张雪辉，唐 蕊，魏洪亮

（1.邢台学院化学工程与生物技术学院 河北邢台 054001； 2.保定市农业局 河北保定 071000）

黄瓜枯萎病是由半知菌亚门尖镰孢菌黄瓜专化型（Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinumOwen.）所引起的一种在全球范围内传播的土传真菌病害，该病一般可造成黄瓜产量下降10%～30%，严重时可致使黄瓜产量下降80%～90%，对黄瓜产量有很大影响[1-2]。近年来随着黄瓜种植面积的增长，由连作重茬而引起的黄瓜枯萎病日渐严重。在实际生产中除了选用抗病品种、结合轮作倒茬和嫁接等栽培管理之外，使用药剂防治是黄瓜枯萎病防治的重要方法，但当前因缺乏安全有效的药剂，极易造成农药残留，从而危害人畜健康及环境安全。生物防治是目前研究克服土传病害的重要方向，主要利用拮抗微生物及其产生的代谢物进行植物病害的预防与治理，又以其安全和高效的特点日益引起人们的关注[3-4]。笔者以从多年种植黄瓜的土壤中分离得到的对黄瓜枯萎病拮抗作用较好的菌株GK-6为试验材料，通过试验找出GK-6菌株抗菌代谢物产生的最佳培养条件，为开发新型生物药剂提供理论依据，进而为黄瓜的绿色生产保驾护航。

1 材料与方法

1.1 材料

拮抗菌GK-6、黄瓜枯萎病菌菌株均由邢台学院微生物实验室提供。

培养基为马铃薯培养基（PDA）、牛肉膏蛋白胨培养基（LB）、LB液体培养基。

1.2 方法

1.2.1 母液制备 将保存的菌种GK-6转接到LB培养基平板上活化，24h后接种于100mL液体培养基中，然后在28℃、170 rpm振荡条件下培养24 h,经血球计数板计数得到密度为4.2×108cfu·mL-1的悬浮液，置于4℃冰箱保存，作为母液备用[5]。……