陈明明，王开林，杨林昆，李林辉，王宝英，王福兄，郝志明

(天津农学院 动物科学系，天津 300384)



-80 ℃超低温冰箱冷冻保存猪精液的初步研究

陈明明，王开林，杨林昆，李林辉，王宝英，王福兄，郝志明

(天津农学院 动物科学系，天津 300384)

本试验从细管规格、基础稀释液成分(柠檬酸和甘氨酸)、甘油浓度和解冻方法对猪精液在-80 ℃超低温冰箱中冷冻保存冻后精子存活率的影响进行了研究。结果表明：(1)0.25 mL和0.5 mL细管之间没有明显差异(P>0.05)，其冻后存活率均达到0.57左右。(2)冷冻液中甘油浓度为3%时，冻后猪精子存活率最高，达0.50±0.035；基础液中柠檬酸的含量为1.3%时，精子的冻后存活率极显著高于1.7%时(P<0.01)；基础液中甘氨酸的含量为7.5 mg/mL时，则不能影响精子的冻后存活率(P>0.05)。(3)解冻方法为61 ℃ 5 s时，精子冻后存活率最高，达0.61±0.055。

猪精液；-80 ℃超低温冰箱；细管规格；柠檬酸；甘氨酸；甘油浓度；解冻方法

1776年，Spallanazani将青蛙、马和人类的精液置于雪中以尝试冷冻保存[1]。此后，精液0 ℃以下保存的研究受到了广泛的关注。直到1949年，Polge等[2]发现甘油对精子具有抗冻保护作用后，精液的冷冻保存技术才取得了重大的突破，并于1956年，首次成功冷冻保存了猪精液[3]。但此后多年，由于猪精子对低温更加敏感，以及猪输精量大和常温保存较为成功，使猪精液的冷冻保存研究和应用停滞不前。近些年来，随着低温生物学以及牛、犬等动物精子冷冻保存技术的发展，猪精子冷冻保存的研究明显增多，效果显著提高，冻后存活率超过0.5的研究报道比比皆是[4～7]。精液冷冻保存的方法有采用液氮作为冷源的，也有用干冰作为冷源的。本试验以-80 ℃超低温冰箱为冷源，对猪精液的冷冻保存进行了初步研究，以期探索其可行性及其效果。