崔艳伟，李文龙，常文锁，李喜焕，张彩英

（河北农业大学，教育部华北作物种质资源研究与利用重点实验室，河北　保定　071001）

黄烷酮3-羟化酶基因表达分析及转基因大豆新种质创制

崔艳伟，李文龙，常文锁，李喜焕*，张彩英*

（河北农业大学，教育部华北作物种质资源研究与利用重点实验室，河北保定071001）

黄烷酮3-羟化酶（F3H）是大豆异黄酮代谢途径重要酶类。研究F3H在不同大豆品种中的表达差异，并应用转基因途径创制新种质是提高大豆异黄酮含量的重要途径。以高异黄酮含量大豆品种中豆27和低异黄酮含量大豆品种楚秀为试材，采用qPCR技术，分析F3H在大豆不同发育时期、组织部位中的表达差异；并利用花粉管通道转化技术，获得转F3H阳性植株。结果表明：F3H在2个大豆品种R1～R7期叶片中的表达模式不同，中豆27的F3H表达量在R1期最高，而后开始下降，R2～R5期维持较低水平，R6期略有上升，R7期又出现下降；楚秀F3H表达量在R1～R4期较低，R5期出现表达高峰，R6期开始下降。F3H在2个大豆品种R5～R8期籽粒中的表达模式基本相同，表达量均从R5期开始下降，且R6～R8期维持较低水平。基于此，构建F3H RNAi反义载体，并利用花粉管通道技术转入不同大豆品种，获得了5个转基因新材料。

大豆；异黄酮含量；黄烷酮3-羟化酶；基因表达；RNAi

大豆异黄酮合成代谢过程由苯丙烷途径和异黄酮合成途径共同组成，主要存在于豆科植物［1～5］。苯丙氨酸和丙二酰辅酶A在苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羟化酶、香豆酸辅酶A连接酶等多种酶的催化作用下，经羟基化、甲氧基化和烷基化等过程形成不同类型的异黄酮化合物［6～9］。……