郭明星，陈浩宇，梁　璐，张常娥

(广州医科大学病理生理学教研室，广东 广州 511436)



新生大鼠海马神经元原代培养方法的优化与鉴定*

郭明星，陈浩宇，梁璐，张常娥**

(广州医科大学病理生理学教研室，广东 广州 511436)

目的 建立一种简单、高效、稳定的海马神经元原代培养方法，以获得高纯度、高活力的海马神经元。方法 24h内新生鼠，用含B27的Neurobasal无血清培养基培养，显微镜下观察神经元的生长状态，MTS法测定不同时间神经元细胞的活力，并用Tau-1和MAP-2抗体鉴定海马神经元的纯度。结果 ①接种24h后，细胞完全贴壁，可见双突起和多个突起的神经元；72h后，海马神经元胞体饱满，立体感较强，突起之间相互形成突触联系，神经元极性完全建立；5～6d的神经元，突起形成密集的神经纤维网络。②MTS法测定结果显示，在培养1～8d时间内，海马神经元随着培养时间的延长，活力增加，第8d细胞活性到达高峰，继续培养时，活力开始下降。③Tau-1和MAP-2免疫荧光检测神经元，海马神经元纯度达到(85.5±5.4)%。结论 本实验方法简单易行，神经元纯度高、细胞活性好，且体外存活时间长，是神经疾病体外研究的良好细胞模型。

海马神经元；无血清原代培养；方法；优化与鉴定

在神经系统研究领域内，体外培养神经元细胞是研究神经元功能以及病理、生理变化的重要手段之一，在现代医学和神经科学中被广泛应用。原代神经元[1]直接来源于动物脑组织，在形态和生理功能上都能较好的模拟动物的体内细胞，得出的数据结果更加真实可信，与神经细胞系相比，它们能提供准确的生物学信息，并且它具有机体干扰少，影响因素单一，结果容易分析等优点。……