胡海梅，李晓琳，梁双红（广东药学院生命科学与生物制药学院，广东广州 510006）

非病毒基因载体聚酰胺-胺型树枝状大分子-透明质酸聚合物体外细胞毒性

胡海梅，李晓琳，梁双红
（广东药学院生命科学与生物制药学院，广东广州 510006）

目的 研究非病毒基因载体聚酰胺-胺型树枝状大分子（PAMAM）-透明质酸（HA）聚合物的体外细胞毒性。方法 采用MTT法和流式细胞术，分别检测合成的多种PAMAM-HA聚合物对HeLa细胞、Bel-7402细胞和HepG2细胞的细胞毒性及其诱导细胞凋亡的能力。结果PAMAM-HA聚合物的细胞毒性随浓度（50～800 mg·L-1）增加、作用时间（24～72 h）延长、PAMAM的代数（G4，G5）增加及HA的相对分子质量（3850和17 200）和接枝密度（5%～25%）降低而增加。与聚合物PAMAM G4-HA3850-5%和PAMAM G5-HA3850-5%孵育24 h，肝癌细胞Bel-7402细胞凋亡率分别为4.5%和9.9%。聚合物与DNA形成的复合物PAMAM G4-HA3850-5%/DNA和PAMAM G5-HA3850-5%/DNA与细胞共孵育24 h后，细胞存活率均在80%以上，较PAMAM G4/DNA和PAMAM G5/DNA毒性降低（P＜0.05）。结论 经不同接枝量和接枝密度HA修饰的PAMAM细胞毒性降低，是一种较有前途的非病毒基因载体。

聚酰胺-胺型树枝状大分子；透明质酸；细胞毒性；肿瘤细胞；细胞凋亡

DOl:10.3867/j.issn.1000-3002.2016.03.009

非病毒载体主要有阳离子聚合物、阳离子多肽和阳离子脂质体等［1-4］，是基因载体的最新发展和重要补充，具有包封率高、免疫原性低、安全性好、靶向性强、可批量生产和易于进行结构修饰等优点，已成为基因治疗研究的热点［5-6］。聚酰胺-胺型树枝状大分子（polyamide amine dendrimers，PAMAM）由Tomalia等［7］成功合成后，关于PAMAM作为非病毒载体的研究才逐步展开。PAMAM表面带正电荷的氨基基团可与带负电的DNA相互作用形成复合物，保护DNA免受核酸酶降解［8-10］，作为药物载体和基因载体具有较高的稳定性和生物兼容性以及无免疫原性和使用剂量下低细胞毒性等优势［11-13］。……