张远标　尚敏杰　王知非　洪德飞　王伟林　郑跃英★

移植物动脉硬化模型大鼠血管平滑肌细胞原代培养及鉴定

张远标尚敏杰王知非洪德飞王伟林郑跃英★

目的 探讨大鼠腹主动脉移植后，血管平滑肌细胞（VSMC）的分离、培养方法。方法 建立BN至Lewis腹主动脉移植的慢性排斥反应、动脉硬化模型，60d后用组织块贴壁方法分离、培养血管平滑肌细胞并进行传代。采用形态学和肌动蛋白免疫组化鉴定证实为VSMC。结果 细胞呈典型的“峰-谷”样生长，历次传代鉴定均为高纯度VSMC，传代至6代左右仍能保持原有性状，细胞活力未见减低。结论 组织块贴壁法培养大鼠腹主动脉移植后VSMC具有操作简单、细胞活力高、纯度高等优点，可作为研究器官移植慢性排斥反应、移植物动脉硬化新的体外实验模型。

大鼠 腹主动脉移植 血管平滑肌 培养 组织块贴壁法

近年来器官移植短期存活率已经得到明显的提高，但慢性排斥反应导致移植物慢性失功，一直是影响移植物长期存活的主要原因之一［1～3］。慢性排斥反应具有一个共同的组织学表现即移植物动脉硬化［4］，其主要特征是血管平滑肌细胞（VSMC）增殖和细胞外基质增生所致的闭塞性动脉病变。临床上移植物3年动脉硬化的累积发生率达40%，5年则高达50%［5］，故深入研究移植物动脉硬化的发生机制，对防治移植物慢性失功具有重大意义。本课题通过建立移植物慢性排斥反应动脉硬化模型，原代分离培养血管平滑肌细胞，并进行纯化鉴定，为今后移植物慢性失功的防治提供新的思路和理想的体外实验模型。……