余　纳，蔡小燕，林小军，叶静华

(广州市第一人民医院风湿免疫科，广州 510180)



双歧杆菌联合甲氨蝶呤、羟氯喹治疗对RA患者炎性因子水平及病情活动性的影响

余纳，蔡小燕，林小军，叶静华

(广州市第一人民医院风湿免疫科，广州 510180)

目的探讨双歧杆菌联合甲氨蝶呤、羟氯喹治疗对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者血清中炎性因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10，IL-10)]水平及病情活动性的影响。方法将64例RA患者按治疗方法的不同分为试验组和对照组，每组32例。2组均给予甲氨蝶呤、羟氯喹治疗。在此基础上，试验组给予双歧杆菌治疗。比较2组治疗前、治疗3个月后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平及病情活动性评分。结果与治疗前比较，2组治疗3个月后血清TNF-α、IL-6 水平及病情活动性评分均有所下降，血清IL-10水平相对升高(均P<0.05)；与对照组比较，试验组治疗3个月后血清TNF-α、IL-6水平及病情活动性评分均明显降低，血清IL-10水平明显升高(均P<0.05)。结论双歧杆菌联合甲氨蝶呤、羟氯喹治疗RA可明显降低患者体内的炎性因子水平，能够显著缓解RA病情，是一种安全、有效的治疗RA方案。

类风湿性关节炎； 病情活动性； 双歧杆菌； 甲氨蝶呤； 羟氯喹； 炎性因子； 血清

hydroxychloroquine; inflammatory factor; serum

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以关节慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病。RA发病机制较为复杂，至今尚不十分清楚。有研究[1]证实，免疫细胞及其分泌的各类因子在RA的发病中起着重要的作用。目前研究较多的因子有肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白细胞介素(interleukin,IL)[1-3]。国外有研究[4]显示，益生菌可以显著降低RA患者血清TNF-α、IL-6等促炎因子的水平，并可有效缓解病情，但国内相关报道较少，因此本研究尝试采用双歧杆菌联合甲氨蝶呤、羟氯喹治疗RA，并密切观察其对RA患者血清TNF-α、IL-6、IL-10水平及病情活动性的影响。

1　对象与方法

1.1研究对象

选择2013年10月至2015年10月广州医科大学附属广州市第一人民医院收治的RA患者64例，均符合RA的诊断标准[5]，排除：1)合并严重的肝、肾、心、脑、肺，内分泌系统或血液系统的疾病；2)哺乳期及妊娠期的妇女；3)正在服用抗生素或近 2 个月内有胃肠炎病史、有特殊饮食习惯者。将64例患者按治疗方法的不同分为2组：试验组32例，男4例，女28例，年龄51～70(64.21±8.22)岁，病程1～9(5.23±3.97)年。对照组32例，男2例，女30例，年龄49～68(63.01±7.82)岁，病程1～12(5.99±2.89)年。2组性别、年龄及病程比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2研究方法

治疗方法：2组均给予甲氨蝶呤片7.5～15 mg口服，1次·周-1；硫酸羟氯喹片0.2 mg口服，3次·d-1。在此基础上，试验组给予双歧杆菌胶囊420 mg，并与甲氨蝶呤片、硫酸羟氯喹片间隔2 h服用，3次·d-1。2组疗程均为3个月。

标本采集：对2组治疗前、治疗3个月后晨空腹抽取肘静脉血10 mL，2500 r·min-1离心5 min，取血清，放置-80 ℃ 冰箱保存，待测。

检测方法：采用酶联免疫吸附法检测2组治疗前、治疗3个月后血清TNF-α、IL-6、IL-10的水平。TNF-α、IL-6、IL-10试剂盒均购自德国Green-gene公司，具体操作根据试剂盒说明书进行。

病情活动性评分：按RA 病情活动性评分方法，包括52 个关节的压痛评分(Ritchie 指数)、肿胀关节数、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate，ESR)和患者健康状况评分。病情非高度活动性：病情活动性评分≤5.1分；病情高度活动性：病情活动性评分>5.1分。

1.3统计学方法

2　结果

2组治疗前血清TNF-α、IL-6、IL-10水平及病情活动性评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较，2组治疗3个月后血清TNF-α、IL-6水平及病情活动性评分均有所下降，血清IL-10水平相对升高，均P<0.05；与对照组比较，试验组治疗3个月后血清TNF-α、IL-6水平及病情活动性评分均明显降低，血清IL-10水平明显升高，均P<0.05。见表1。

组别n治疗前治疗3个月后TNF-αρ/(ng·L-1)IL-6ρ/(ng·L-1)IL-10ρ/(ng·L-1)病情活动性评分/分TNF-αρ/(ng·L-1)IL-6ρ/(ng·L-1)IL-10ρ/(ng·L-1)病情活动性评分/分试验组3250.32±10.1154.19±15.6030.22±6.686.03±2.4518.91±4.19*#24.32±5.73*#59.88±7.24*#2.08±1.24*#对照组3247.60±7.2458.96±4.1334.22±6.685.99±3.0027.60±7.24*38.96±4.11*40.88±3.60*4.14±2.87*

*P<0.05与治疗前比较，#P<0.05与对照组比较。

3　讨论

RA是一种自身免疫性疾病。20世纪90年代，有研究[5]证实，RA患者存在与健康人群不同的肠道菌群，而这些不同的肠道菌群在RA的发病中可能起着一定的作用。Gomez等[6]研究发现，异常增多的某些肠道特定菌群能够促进RA的发生，并可加快自身免疫性疾病的进展。然而，大量动物实验证明，通过调节或干预肠道黏膜免疫功能，下调Th1或上调Th2，纠正体液免疫，可抑制或控制自身免疫性疾病的发生和发展[7]。

在临床上广泛应用于调节肠道菌群的益生菌，不但具有恢复肠道健康菌群的作用，而且还具有抑制局部甚至系统免疫炎症的特性[8 ]。Vaghef Mehrabany等[4]研究证实，采用乳酸杆菌治疗RA，不但能够改变患者肠道的菌群，明显降低血清TNF-α、IL-6等促炎因子的水平，升高血清IL-10水平，而且还能够显著降低病情活动水平。虽然益生菌作为调整肠道菌群紊乱的药物，已被广泛应用于肠道免疫性疾病，但应用益生菌联合慢作用类抗风湿药治疗RA的报道较少。因此，本研究尝试采用双歧杆菌联合甲氨蝶呤、羟氯喹治疗RA患者(试验组)，并密切监测RA患者治疗后血清中炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-10)水平及病情活动的情况，结果显示，与治疗前比较，试验组和对照组(采用甲氨蝶呤、羟氯喹治疗)治疗3个月后血清TNF-α、IL-6水平及病情活动性评分均有所下降，血清IL-10水平相对升高(均P<0.05)；与对照组比较，试验组治疗3个月后血清TNF-α、IL-6水平及病情活动性评分均明显降低，血清IL-10水平明显升高(均P<0.05)，提示采用双歧杆菌联合甲氨蝶呤、羟氯喹治疗RA可增加患者肠道益生菌的数量，并可抑制患者体内的促炎因子，调高抑炎因子的分泌，使患者体内的Th1 /Th2细胞因子再现平衡，从而达到控制病情的目的。

[1]赵晓菲，安高，郭亚春,等.细胞因子在类风湿性关节炎中的研究进展[J].承德医学院学报，2016，33(1)：53-56.

[2]李菁，赵岩.白细胞介素6及其受体拮抗剂在类风湿关节炎发病机制及治疗中的作用[J].中华医学杂志，2014，94(39)：3114-3116.

[3]刘家炜，唐小穗.FTY720联用CsA在类风湿性关节炎中的治疗作用[J].现代预防医学，2015，42(24)：90-94.

[4]Vaghef Mehrabany E，Alipour B，Homayouni Rad A，et al.Probiotic supplementation improves inflammatory status in patients with rheumatoid arthritis[J].Nutrition，2014，30(4)：430-435.

[5]Eerola E，Möttönen T，Hannonen P，et al.Intestinal flora in early rheumatoid arthritis[J].Br J Rheumatol，1994，33(11)：1030-1038.

[6]Gomez A，Luckey D，Yeoman C J，et al.Loss of sex and age driven differences in the gut microbiome characterize arthritis-susceptible 0401 mice but not arthritis-resistant 0402 mice[J].PLoS One，2012，7(4)：e36095.

[7]Xiao B G，Link H.Mucosal tolerance：a two-edged sword to prevent and treat autoimmune diseases[J].Clin Immunol Immunopathol，1997，85(2)：119-128.

[8]Homayouni Rad A,Torab R,Ghalibaf M，et al.Might patients with immune-related diseases benefit from probiotics?[J].Nutrition，2013，29(3)：583-586.

(责任编辑：胡炜华)

Effects of Bifidobacterium Combined with Methotrexate and Hydroxychloroquine on Inflammatory Factor Levels and Disease Activity in Patients with Rheumatoid Arthritis

YU Na，CAI Xiao-yan，LIN Xiao-jun，YE Jing-hua

(DepartmentofRheumatologyandImmunity，GuangzhouFirstPeople’sHospital，Guangzhou510180，China)

ObjectiveTo investigate the effects of bifidobacterium combined with methotrexate inflammatory factor and hydroxychloroquine on serum levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-6(IL-6) and interleukin-10(IL-10)and disease activity in patients with rheumatoid arthritis(RA).MethodsSixty-four patients with RA were divided into two groups: experimental group(treatment with bifidobacterium,methotrexate and hydroxychloroquine) and control group(treatment with methotrexate and hydroxychloroquine),with 32 patients in each group.Serum levels of TNF-α,IL-6 and IL-10 and were measured and disease activity score before and after treatment for 3 months.ResultsAfter treatment for 3 months,levels of TNF-α and IL-6 and scores of disease activity decreased but levels of IL-10 increased in both groups(P<0.05).Compared with control group,levels of TNF-α and IL-6 and scores of disease activity decreased but levels of IL-10 increased in experimental group after treatment for 3 months(P<0.05).ConclusionCombined treatment with bifidobacterium,methotrexate and hydroxychloroquine can safely and effectively reduce inflammatory factor levels and mitigate disease severity in patients with RA.

rheumatoid arthritis; disease activity; bifidobacterium; methotrexate;

2016-02-04

余纳(1976—)，女，硕士，副主任医师，主要从事风湿病的临床与基础研究。

R593； R971+.1

A

1009-8194(2016)05-0012-03

10.13764/j.cnki.lcsy.2016.05.005