孙锐，孙玉凡，张晓丹，陈刚，刘梦杰，李洁，张加，吴晶，张文宏，张颖，张文

1.复旦大学生物医学研究院, 上海 200032； 2.复旦大学附属华山医院, 上海 200031



·论著·

分枝杆菌核糖体的制备与初步结构研究

孙锐1,*，孙玉凡1,*，张晓丹1,*，陈刚2，刘梦杰1，李洁1，张加2，吴晶2，张文宏2，张颖2，张文1

1.复旦大学生物医学研究院, 上海 200032； 2.复旦大学附属华山医院, 上海 200031

核糖体是抗生素的主要靶点，而获得足量高纯度的核糖体是进行结构和药物研究的基础。结核分枝杆菌壁厚且生长缓慢，制备足量高纯度的核糖体具有挑战性。本研究改进并优化了核糖体纯化制备方法，通过大量培养和安全处理致病菌，应用高效破碎厚壁革兰阳性菌的技术，结合传统的蔗糖密度离心分离和蛋白液相色谱纯化技术，经多步纯化和分离，获得了高纯度和较高产率的耻垢分枝杆菌与结核分枝杆菌的核糖体样品，为后续生化实验和结构生物学研究提供了保证。该分枝杆菌核糖体制备方法也可应用于其他革兰阳性致病菌复合物样品的直接提纯，以及复合物特异性的进一步研究，特别是利用晶体学与冷冻电镜结合的高精度复合物结构研究，有助于揭示细菌耐药性机制及用于新型抗生素的研发。

分枝杆菌；核糖体纯化；结构生物学；抗生素耐药性

目前结核病呈高发趋势，全球每年有900 多万新发病例，死亡病例约150万。迄今已有约20亿人被结核分枝杆菌感染，而我国高达44.5%的感染率和日益严重的耐药性问题，已成为严重的公共卫生和社会问题[1-2]。……