刘 萍　马全英　宋玉霞　刘学荣　牟克斌　王超英　董金杰（中农威特生物科技股份有限公司　甘肃 兰州　730046）

DAPI染色法在检测BHK-21细胞周期的应用

刘 萍马全英宋玉霞刘学荣牟克斌王超英董金杰*
（中农威特生物科技股份有限公司甘肃 兰州730046）

为建立一种检测细胞周期的方法，取悬浮培养的BHK-21细胞按照4，6-联脒-2苯基吲哚（DAPI） 染色方法进行染色，利用NC-3000细胞分析仪进行细胞周期分析。结果表明，DAPI标记法简单易行，DAPI标记法能够准确的进行细胞周期检测。

DAPI染色法细胞周期流式细胞技术

细胞周期分析，对反映一个细胞群体的增殖活性具有重要意义，利用流式细胞术进行DNA含量测定是细胞周期分析的重要手段，直到目前仍然是广泛使用的方法之一，应用细胞流式技术进行细胞周期检测，其结果不仅受样品固有性、样品的处理方法及荧光染色的影响，还受分析方法的影响目前，用于检测细胞周期的染料种类较多，其中碘化丙啶（PI）是常用染料，但嵌入到双链DNA 和RNA 的碱基对中与之结合，无碱基特异性，故染色前必须用核糖核酸酶A处理细胞，排除双链RNA的干扰［1-2］。4，6-联脒-2苯基吲哚（DAPI）是DNA特异性的荧光染料，与DNA结合是非嵌入式的，主要结合在A-T碱基区，使用时无需用RnaseA处理细胞， 但由于配置紫外激光源的流式细胞仪非常昂贵，大多数实验室都没有配备。因此，以DAPI 标记DNA 分析细胞周期的方法尚未成为常规检测方法被普遍采纳，也没有简单的标准实验流程可供参考［3-4］。

本试验拟采用DAPI标记BHK-21细胞以探索简便易行的DNA 检测技术，检测细胞周期中各期的DNA 含量，以便及时预测规模化培养细胞培养细胞增殖活性的情况，为规模化细胞培养的检测奠定基础。……