慢病毒介导的FoxA1高表达对乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡探究
2016-09-08周连帮万圣云史加宁
郑 璐,汤 铜,钱 波,周连帮,万圣云,张 磊,史加宁,李 佳
慢病毒介导的FoxA1高表达对乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡探究
郑璐,汤铜,钱波,周连帮,万圣云,张磊,史加宁,李佳
目的 利用慢病毒载体,构建乳腺癌MCF-7高表达FoxA1细胞株,并初步探究FoxA1对乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡的影响。方法 将FoxA1基因重组构建慢病毒载体穿梭质粒EX-Z1010-LV201,经PCR和测序后在脂质体Lipofectamine2000介导下转染293T细胞包装慢病毒,嘌呤霉素筛选出稳定转染的细胞,Real-Time PCR法检测稳定转染MCF-7细胞株中FoxA1基因的表达水平,MTT及流式细胞术对比高表达FoxA1细胞株与对照细胞株增殖凋亡差异。结果 PCR扩增和测序结果证实成功构建FoxA1慢病毒载体并包装慢病毒,成功筛选出FoxA1高表达的乳腺癌MCF-7细胞系。MTT及流式细胞术结果显示:与对照组比较,上调FoxA1乳腺癌MCF-7细胞株增殖下降,凋亡率增加。结论成功构建了重组慢病毒载体,并筛选出稳定高表达FoxA1的MCF-7细胞株,FoxA1可能参与了乳腺癌MCF-7细胞株增殖凋亡调控,为下一步进行其机制探讨提供了依据。
FoxA1;慢病毒载体;MCF-7;增殖凋亡
网络出版时间:2016-5-9 15:43:10 网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160509.1543.028.html
根据美国癌症协会(ACS)估计,美国2014年确诊的乳腺浸润性癌约235 030例,新确诊的乳腺癌病例约62 980例,死于的患者约40 430例[1],另外约64 640例妇女在同年被诊断患有乳腺原位癌[2],乳腺癌已成为美国妇女最常见的恶性肿瘤,在过去的几十年乳腺癌的发病率逐年上升,而死亡率呈现下降趋势,这得益于对乳腺癌早期发现和更加有效的治疗。FoxA1(Forkhead box A1)属于Fox转录因子家族成员之一[3],又名肝核因子3(HNF-3α),因其是从肝脏中纯化而命名。……
