β-榄香烯干预人肝细胞癌HepG2细胞蛋白质组学研究
2016-09-08张义敏李萍田明涛唐承
张义敏, 李萍, 田明涛, 唐承
(1.山东中医药大学,山东济南 250355;2.威海市胸科医院,山东威海 264200)
β-榄香烯干预人肝细胞癌HepG2细胞蛋白质组学研究
张义敏1,2,李萍2,田明涛2,唐承2
(1.山东中医药大学,山东济南250355;2.威海市胸科医院,山东威海264200)
【目的】通过观察不同浓度β-榄香烯作用于体外培养人肝细胞癌HepG2细胞的产生的差异性蛋白质表达,筛选β-榄香烯防治肝癌的作用靶点。【方法】于体外常规条件下,以0、10、30 μg/mL β-榄香烯培养基孵育人肝细胞癌HepG2 24 h,提取蛋白质后采用十二烷基硫酰钠—聚丙烯酸胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)分离蛋白,选取表达量升高或降低3倍以上的蛋白质点进行质谱鉴定,随后运用Protein Chip PBS1j-C型蛋白质芯片阅读仪将其检测绘制成蛋白质质谱。使用GPS Explore V 3.6软件对所有蛋白质质谱进行分析,并通过MASCOT V 2.1搜库软件进行检索,以鉴定蛋白质质点。【结果】通过对β-榄香烯处理前后肝癌HepG2细胞蛋白双向凝胶电泳图谱分析,共得到91个差异蛋白质点。选择表达量差异明显的53个蛋白质点进行质谱分析,得到具有统计学意义的差异蛋白质点9个,其中表达上调3个,分别是UBE2V1、SF1、Annexin V;表达下调6个,分别是β-Actin、S100A6、HSP70、Keratin4、FUBP1、Keratin18。【结论】β-榄香烯可影响人肝细胞癌HepG2细胞的蛋白质表达,这些蛋白质可能是β-榄香烯防治肝癌的作用靶点。
β-榄香烯;肝癌;蛋白质组学;HepG2
原发性肝癌是严重危害人类生命健康的重大疾病之一。目前原发性肝癌的治疗以手术为主[1],但对于特殊部位或者晚期患者,仍缺乏有效的治疗手段。近年来,研究者们从中国传统中药中发现了一些具有抗肿瘤活性的有效成分,中药有效成分抗肿瘤研究已成为国内外研究的热点[2]。……
