人参皂苷Rh2对LoVo细胞迁移和转移能力的影响及机制研究
2016-09-08张晓圆李荣江孙继贤孙砚辉张苗苗伍志学张韧邝枣园
张晓圆, 李荣江, 孙继贤, 孙砚辉, 张苗苗, 伍志学, 张韧, 邝枣园
(1.广州中医药大学基础医学院生物技术系,广东广州 510006;2.深圳市宝安区中心医院普外科,广东深圳 518102)
人参皂苷Rh2对LoVo细胞迁移和转移能力的影响及机制研究
张晓圆1,李荣江2,孙继贤1,孙砚辉1,张苗苗1,伍志学1,张韧1,邝枣园1
(1.广州中医药大学基础医学院生物技术系,广东广州510006;2.深圳市宝安区中心医院普外科,广东深圳518102)
【目的】 探讨人参皂苷Rh2对人结肠癌LoVo细胞迁移和转移能力的影响。【方法】通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度Rh2对LoVo细胞增殖的影响,并确定用于研究抑制LoVo细胞迁移和转移功能作用的Rh2浓度和作用时间。设置空白对照组及Rh2实验组(5、10、20、40、60 μmol/L),通过划痕试验,对LoVo细胞划痕加药处理24 h后,观察不同浓度Rh2对细胞迁移的影响。采用Transwell法观察不同浓度Rh2对细胞转移的影响。采用Western blot检测不同浓度Rh2对CD44、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)、E-Cadherin和β-catenin表达水平的影响。【结果】MTT结果显示:0~40 μmol/L Rh2处理LoVo细胞24 h对其生长无明显影响。随Rh2作用时间的延长和浓度的增加,Rh2对LoVo细胞抑制作用逐步增强。划痕试验和Transwell结果表明:随着Rh2浓度增加,其对LoVo细胞迁移和转移能力的抑制作用增强,20 μmol/L以上浓度的Rh2处理LoVo细胞24 h与空白对照组比较具显著抑制作用。Western blot结果表明:随着Rh2浓度的升高,CD44、MMP2蛋白表达水平下降,TIMP2、E-Cadherin和β-catenin蛋白表达水平上升。【结论】人参皂苷Rh2对人结肠癌LoVo细胞迁移和转移能力有抑制作用,其抑制作用具有时间和浓度依赖性。
人参皂苷Rh2;LoVo细胞;细胞迁移;细胞转移;……
