宋文金，沈喜玉，李　季，毕　岩

(盘锦市中心医院 骨外科，辽宁 盘锦 124000)



miR-499-5p调控AKT2基因对骨肉瘤MG63细胞凋亡和迁移的影响

宋文金，沈喜玉，李季，毕岩

(盘锦市中心医院 骨外科，辽宁 盘锦 124000)

目的探讨miR-499-5p在骨肉瘤MG63细胞中的表达及其对MG63细胞凋亡和迁移的影响。方法运用生物信息学软件TargetScan和miRanda对miR-499-5p和AKT2基因的靶向配对关系进行预测。未转染细胞设为空白对照组(control组)，脂质体2000转染miR-499-5p模拟物为mimics组，转染干扰AKT2基因的siRNA为siRNA组。 Real-time PCR检测3组细胞中miR-499-5p和AKT2 mRNA的表达情况，western blot检测AKT2蛋白的表达情况，流式细胞术检测3组细胞凋亡情况，细胞划痕实验检测体外的迁移情况。结果TargetScan和miRanda显示miR-499-5p和AKT2基因二者靶向配对良好。Real-time PCR检测结果表明转染mimics后，AKT2 mRNA的表达量降至(45.06±8.12)%，与control组(100%)比较，差异有显著性意义(P<0.05)。Western blot检测结果表明mimics组AKT2蛋白相对表达量为(0.32±0.05)，与comtrol组(0.69±0.11)比较，明显降低，P<0.05。流式细胞术和细胞划痕实验结果显示mimics组MG63细胞凋亡率(18.97±2.41)%及细胞划痕愈合率(63.54±5.43)%，与control组(10.35±2.56)%和(90.35±6.81)%相比差异均有显著性意义(P<0.05)。结论miR-499-5p能够下调骨肉瘤MG63细胞中AKT2基因的表达，促进癌细胞的凋亡以及抑制细胞的迁移。

微小RNA；丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2；骨肉瘤MG63细胞

[引用本文]宋文金，沈喜玉，李季，等.miR-499-5p调控AKT2基因对骨肉瘤MG63细胞凋亡和迁移的影响[J].大连医科大学学报，2016,38(4)：326-329，333.

骨肉瘤是常见的原发骨组织恶性肿瘤，约占骨原发肿瘤的 20%，恶性程度高。近年来，随着外科保肢技术的发展以及新的辅助化疗方案的应用，骨肉瘤的治疗已取得了显著的进步。但是，由于骨肉瘤具有高度的侵袭性以及容易转移，骨肉瘤患者的预后比较差，死亡率仍然较高。因此，认识骨肉瘤发生进展的机制显得极为重要。MicroRNA(miRNA)是一类非编码RNA，长度大约为21～25 nt，通过与靶基因mRNA 3' 端非翻译区(3' UTR)互补，降解目的基因并下调其表达[1]，以此参与疾病发生过程中基因表达的调控。AKT是一种对细胞代谢、增殖和迁移等生命活动有重要功能的蛋白激酶，能够磷酸化丝氨酸/苏氨酸[2]。……