聚丙烯酰胺凝胶低毒性替代材料研究
2016-09-07王国瑀杨美娟王俊秀杨志伟喻长远北京化工大学生命科学与技术学院北京0009
化工设计通讯 2016年3期
关键词:体系
王国瑀,杨美娟,王俊秀,王 磊,杨志伟,喻长远(北京化工大学生命科学与技术学院,北京 0009)
聚丙烯酰胺凝胶低毒性替代材料研究
王国瑀1,杨美娟2,王俊秀2,王磊2,杨志伟2,喻长远2
(北京化工大学生命科学与技术学院,北京 100029)
聚丙烯酰胺凝胶电泳广泛用于分子生物学实验。但是丙烯酰胺具有潜在神经毒性。我们采用N,N-二甲基丙烯酰胺(DMA)和N-(2-羟乙基)丙烯酰胺(HEA)两种单体材料代替丙烯酰胺制备蛋白质凝胶。通过测定聚合反应体系的温度变化,优化了体系中催化剂TEMED的加入量;通过实际的电泳实验确定了单体与交联剂与N,N-甲叉双丙烯酰胺的配比,使其得到孔径大小适宜的凝胶,并对这两种凝胶的性能做出初步的评价。最后,将优化好条件的凝胶应用于Western Blot技术分析检测BSA蛋白,蛋白条带明亮清晰。
聚丙烯酰胺凝胶;低毒;材料
聚丙烯酰胺凝胶电泳以其低廉的分析成本、简单的操作、良好的重复性、较短的分析时间等优势,广泛应用于生物、医学、食品、农学等诸多学科领域蛋白质以及多肽类化合物的分离鉴定。其分离机制是在电场的作用下,蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶所形成的网状结构中发生迁移,其迁移的距离与电泳条件以及蛋白质分子的分子量大小、形状及电荷量有关。而SDS-PAGE是在电泳缓冲溶和蛋白样品溶中分别加入了离子去污剂(SDS)和强还原剂(β-巯基乙醇),使得蛋白质的迁移距离主要取决于蛋白质分子量的大小而忽略了蛋白质自身所带电荷带来的影响。……
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