周朝晖，刘鸿雁，安晓芳，贾　忠，樵小健，姜专基天水市中西医结合医院，甘肃 天水 7400；兰州市肺科医院；3甘肃省肿瘤医院

安乳消痛丸对乳腺增生模型大鼠的影响

周朝晖1，刘鸿雁2，安晓芳1，贾忠2，樵小健1，姜专基3△
1天水市中西医结合医院，甘肃 天水 741020；2兰州市肺科医院；3甘肃省肿瘤医院

目的：研究中药安乳消痛丸对大鼠的增生乳腺肉眼形态、组织病理学形态和血清雌、孕激素水平的影响。方法：建立乳腺增生大鼠模型，空白对照组：给予蒸馏水灌胃，20mL/kg，1次/d，连续25天。模型对照组：给予蒸馏水灌胃，20mL/kg，1次/d，连续25天。安乳消痛丸低、中、高剂量分别给予安乳消痛丸低（2.5g/kg）、中（5.1 g/kg）、高（7.7 g/kg）剂量，20mL/kg，1次/d，连续25天。结果：与空白对照组相比，模型组大鼠血清雌二醇（E2）含量显著增高，孕酮（P）含量明显降低，安乳消痛丸各剂量组大鼠血清E2含量降低、P含量升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；安乳消痛丸可减轻大鼠乳头肿胀度，降低乳腺组织重量；安乳消痛丸可可减少大鼠乳腺小叶和腺泡数目，降低腺泡上皮细胞高度，缩小腺腔直径。结论：安乳消痛丸通过调节大鼠血清性激素水平，改善乳腺组织病理变化，对大鼠乳腺增生具有较好治疗作用。其机理可能是通过降低血清E2含量，升高P含量，调节二者的相对平衡而实现的。

安乳消痛丸；性激素；乳腺增生；动物实验；大鼠

乳腺增生是女性常见病，发病率约占乳房疾病的75%，居乳腺疾病首位，随着生活节奏加快、女性社会压力增大及受生育率下降的影响，该病的发病率逐年增高，近年来已引起普遍关注［1］。目前临床上对乳腺增生病还没有一种适用性广且疗效肯定的治疗药物或方案［2］。中医药治疗乳腺增生病有其独到之处。安乳消痛丸为院内中药制剂，多年来临床用于治疗乳痛症和乳腺增生症。笔者对安乳消痛丸干预大鼠乳腺增生模型进行了药效学研究，为其临床使用提供动物实验和组织病理学依据。

1　材料与方法

1.1实验动物S D大鼠，雌性，清洁级，体质量190～200 g，购自兰州生物制品研究所实验动物中心，合格证号：医动字第14-001。

1.2药品及试剂苯甲酸雌二醇注射液（天津金耀氨基酸有限公司生产，国药准字H12020534）、黄体酮注射液（天津金耀氨基酸有限公司生产，国药准字H12020529）；乳康片（安康正大制药有限公司生产，国药准字Z20003227）；安乳消痛丸（甘肃省肿瘤医院院内中药制剂，甘药制字Z20140008）；生理盐水（四川科伦药业股份有限公司生产，国药准字H51021157）；人血清雌二醇（E2）、孕酮（P）放射免疫试剂盒（均由深圳拉尔文生物工程有限公司提供）。

1.3方法

1.3.1乳腺增生模型的建立成年雌性未孕S D大鼠60只，体质量190～200 g，正常饲养5天后，采用随机数字表法分为安乳消痛丸高、中、低剂量组，乳康片组，模型对照组，空白对照组，每组10只。空白对照组肌肉注射等量生理盐水，其他各组大鼠肌肉注射雌二醇0.5mg/（k g·d）共25天后注射黄体酮5mg/（k g·d）共5天。实验第31天从模型对照组和空白对照组随机抽取实验大鼠各3只，行组织病理学检查，如显示模型组大鼠乳腺导管及腺泡增生，则提示造模成功。

1.3.2给药造模成功后开始灌胃给药。空白对照组给予蒸馏水灌胃，20mL/k g，1次/d，连续25天。模型对照组给予蒸馏水灌胃，20mL/k g，1次/d，连续25天。安乳消痛丸低、中、高剂量组分别给予安乳消痛丸低（2.5mL/k g）、中（5.1 mL/k g）、高（7.7 g/k g）剂量，20mL/k g，1次/d，连续25天。

1.3.3样本采取各组大鼠于末次给药后禁食10小时，先称取大鼠体质量并记录，然后按照体质量腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉，股动脉采血，离心保存，待后期采用放射免疫法测定大鼠血清E2、P水平；最后脱臼法处死大鼠，用打孔器于第2～3对乳房中心对大鼠乳腺腺体组织进行取材，电子天平称重后用中性甲醛溶液固定，石蜡包埋、切片、染色。光学显微镜下观察大鼠乳腺组织形态学变化，每例样本随机选取5个视野，取乳腺小叶数量及腺腔直径平均值计数，按半定量分级标准比较分析，进行统计处理。

1.4统计学方法应用S P SS 13.0软件包进行统计学处理，多组比较行单因素方差分析，方差齐性时用L S D检验，方差不齐用D unn et t′s T3检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1体质量和乳腺肉眼形态自造模起，体质量随时间延长而逐步降低，至造模结束时，大多数大鼠体质量未恢复至造模前；肉眼观察大多数大鼠乳腺增大、发育，乳头红肿，触之较韧，部分伴有乳晕形成。给予安乳消痛丸治疗后，各剂量组大鼠乳头红肿减轻，触之较软，增生状态减轻。而模型对照组乳头无明显变化。空白对照组大鼠实验结束时，体质量增加，未见明显增生。

2.2血清E2、P水平与空白对照组相比，模型对照组的E2水平明显升高、P水平明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。安乳消痛丸各剂量组及乳康片组血清E2水平不同程度降低，P水平不同程度升高。安乳消痛丸降低E2及升高P的作用具有剂量依赖性，随着药物剂量的增加，其降低或升高的程度逐渐增强，与模型对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.3乳房质量与空白对照组比较，模型对照组大鼠第2、3对乳房质量均显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。与模型对照组比较，安乳消痛丸低、中、高剂量组均可降低乳腺增生大鼠第2、3对乳房的质量，差异有统计学意义（P＜0.05），随着剂量的增加其降低程度增强，与模型对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1　各组乳腺增生模型大鼠激素水平比较（±s）

表1　各组乳腺增生模型大鼠激素水平比较（±s）

注：与模型对照组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；与正常对照组比较，#表示P＜0.05，##表示P＜0.01。

表2　各组乳腺增生模型大鼠乳房质量比较（±s）

表2　各组乳腺增生模型大鼠乳房质量比较（±s）

注：与模型对照组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；与正常对照组比较，#表示P＜0.05，##表示P＜0.01。

2.4乳腺病理学空白对照组大鼠乳腺导管、小叶、腺泡镜下组织结构基本正常，腺体未见明显增生。模型对照组大鼠乳腺部分小导管扩张，导管壁略有增厚，周围纤维组织增生明显，细胞较为活跃，间质有少量以小淋巴细胞为主的炎性细胞浸润；乳腺小叶单位数目增多密集，小叶形态欠规则，镜下显示相互靠近，较为拥挤；乳腺腺泡大小不等，数目增多，形态不规则，甚至变形，部分结构混乱，可见融合倾向，腺泡内有粉色渗出物。安乳消痛丸各剂量组、乳康片组大鼠增生程度均有减轻，其中安乳消痛丸高、中剂量组与与模型对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3—4及图1—6。

表3　各组乳腺增生模型大鼠乳腺病理组织比较Ⅰ（±s）

表3　各组乳腺增生模型大鼠乳腺病理组织比较Ⅰ（±s）

注：与空白对照组比较，##表示P＜0.01；与模型对照组比较，*表示P＜0.05；**表示P＜0.01。

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表4　200 HPF下各组乳腺增生模型大鼠乳腺病理组织比较Ⅱ（±s）

表4　200 HPF下各组乳腺增生模型大鼠乳腺病理组织比较Ⅱ（±s）

注：与空白对照组比较，##表示P＜0.01；与模型对照组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01。

组别　只数　剂量/（g·kg-1）　乳腺小叶数/个　腺腔直径/mm左侧　右侧　左侧　右侧空白对照组　10　-　16.13±4.78　16.94±4.18　0.31±0.14　0.30±0.16模型对照组　10　-　26.03±2.46##　25.68±2.36##　0.99±0.17##　1.00±0.18##乳康片组　10　0.675　15.00±4.08**　15.06±3.26**　0.67±0.26*　0.65±0.24*安乳消痛丸高剂量组　10　7.700　15.40±4.50**　13.90±3.38**　0.41±0.16**0.41±0.17**安乳消痛丸中剂量组　10　5.100　16.00±4.89**　16.00±4.89**　0.76±0.18*　0.73±0.17*安乳消痛丸低剂量组　10　2.500　23.11±1.91　23.00±3.62　0.81±0.24　0.80±0.26

图1　HE染色10×40空白对照组　

图2　HE染色10×40模型对照组

图3　HE染色10×40乳康片组

图4　HE染色10×40　安乳消痛丸大剂量组　

图5　HE染色10×40安乳消痛丸中剂量组

图6　HE染色10×40安乳消痛丸小剂量组

3　讨论

雌激素和孕激素在维持女性第二性征和内分泌功能稳定方面具有重要作用，乳腺是女性性激素的重要靶器官之一，雌激素的生理作用为刺激乳腺导管和小叶增生，同时促进组织水、钠潴留，进一步引起小叶间质水肿，乳腺增生病的发生与体内E2水平失衡，同时P的拮抗作用不足有明显关系。

中医药在治疗乳腺增生病方面有其独特的优势，通常通过直接或间接降低体内雌激素的水平和作用来发挥治疗作用［4］。安乳消痛丸是中药制剂，主要由柴胡、当归、白芍、仙茅、淫羊藿、巴戟天、川芎等组成。当归补血活血，调经止痛；白芍养血敛阴，柔肝止痛；仙茅行血消肿；川芎活血止痛；柴胡和巴戟天用于月经不调［5］。诸药合用具有明显的止痛和抗乳腺增生作用。

在本实验中，乳腺增生大鼠经安乳消痛丸治疗后，血清E2水平降低，乳腺腺泡数目减少，部分腺泡出现萎缩现象，导管扩张程度减轻，部分乳腺已恢复到正常状态。随着安乳消痛丸给药剂量逐渐增加，E2逐渐降低、P水平逐渐升高，该结果提示安乳消痛丸能够影响模型大鼠E2、P水平，且存在量效关系，这可能是安乳消痛丸治疗乳腺增生病的主要机理［6］。此外组织病理结果也显示，安乳消痛丸对乳腺增生有良好的治疗作用。但其在人体中的抗增生机理和血清学变化还有待于进一步临床研究明确。

［1］ 王玉兰.健康知识教育联合生活习惯护理在体检发现乳腺增生患者护理中的应用价值［J］.西部中医药，2014，27（2）：122-123.

［2］ 张春霞，李晓琴，孙亮，等.平衡针刺配合桂枝茯苓丸治疗乳腺囊性增生疗效观察［J］.西部中医药，2013，26（8）：111-113.

［3］ 王灿，苗明三.乳络通胶囊对大鼠乳腺增生模型的影响［J］.中药药理与临床，2014，30（2）：128-130.

［4］ 姚艳飞，路秀丽，王莘.蛹虫草菌丝体多糖对小鼠乳腺增生模型的影响［J］.中草药，2011，42（9）：1796-1798.

［5］ 刘鸿雁，张樱山，陈德道，等.HPLC法测定二十五味珍珠丸中3种成分［J］.中成药，2013，35（8）：1689-1692.

［6］ 阮诗兰，周胜利，金鹤.中医药治疗乳腺增生的研究进展［J］.安徽医药，2011，15（12）：1593-1595.

Effectsof AnRu XiaoTong Pillson the RatM odelw ith M amm ary G land H yperp lasia

ZHOU Chaohui1，LIU Hongyan2，AN Xiaofang1，JIA Zhong2，QIAO Xiaojian1，JIANG Zhuanji3△
1 TianshuiMunicipality Integrative Medicine Hospital，Tianshui741020，China；2 Lanzhou Municipal Lung Hospital；3 Gansu Provincial Cancer Hospital

Objective：To study the influence of AnRu XiaoTong pillson the levelsof estrogen（E2）and progesterone（P），histopathologicalmorphology and themorphology of hyperplasticmammary gland in the naked eye examination of the rats.Methods：Ratmodelsw ith hyperplasiawere prepared，blank controlgroup：intragastric administration of distilled water，20m L/kg，once each day，for 25 consecutive days.Model control group：intragastric adm inistration of distilled water，20 m L/kg，once each day，for 25 consecutive days.High，moderate and low doses groups of AnRu XiaoTong pillswere given w ith AnRu XiaoTong pills in low（2.5 g/kg），moderate（5.1g/kg）and high （7.7 g/kg），20m L/kg，once each day，for25 consecutive days.Results：Compared w ith blank controlgroup，the contents of E2in the serum of the rats notably increased，and the contents of P significantly decreased in themodel group，the contents of E2lowered and the contentsof P increased in different doses groups of AnRu XiaoTong pills （P＜0.05）；AnRu XiaoTong pills could relieve nipple swelling of the rats，decrease theweightofmammary tissue；it could reduce the numbersofmammary gland lobules andmammary acini，decrease the heightof aciniepithelia and reduce acinidiameter.Conclusion：AnRu XiaoTong pills are effective in treatingmammary gland hyperplasia of the ratsby regulating the levelsof sex hormone of the ratsand improving pathological changesofmammary glands.Its mechanism mightbe realized through decreasing the contents of E2and raising the contents of P to adjust relative balance between E2and P.

AnRu XiaoTong pills；sex hormone；mammary gland hyperplasia；animalexperiment；the rats

R285.5

A

1004-6852（2016）04-0026-04

2015-10-04

周朝晖（1979—），男，副主任医师。研究方向：乳腺疾病的临床诊治。

姜专基（1978—），男，副主任医师。研究方向：乳腺肿瘤。