余　优　王春台　刘新琼

（中南民族大学生命科学学院湖北武汉430074）

果蝇唾腺染色体制片方法的改进

余优王春台刘新琼*

（中南民族大学生命科学学院湖北武汉430074）

果蝇唾腺染色体的制片观察是高等学校遗传学实验的主要内容之一，但传统的制片方法往往不易得到理想的制片效果，需要大量的活体材料的准备与学生剖取腺体的操作。根据长期的教学实践，对实验作了一些改进，最终使唾腺染色体各臂能较好的伸展开，易于观察，得到了较好的实验结果。

果蝇唾腺染色体；解离时间；遗传学实验

果蝇是一种模式生物，是遗传学实验的最佳材料。果蝇幼虫唾腺的染色体在细胞分裂间期不断地进行自我复制而不分开，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称多线染色体。因此，果蝇唾腺染色体是观察染色体形态特征，研究其化学组成、基因表达调控以及各类神经疾病的研究等方面很好的材料。但是按照实验教材上的方法，则学生难以把握，成功率较低，通过长期的教学经验和方法探索，笔者在实验操作上进行了一些改良，取得了较好的结果。

1　材料与方法

1.1材料果蝇三龄幼虫。

1.3试剂0.7%氯化钠、1mol/L HCl、改良苯酚品红染液。

1.3操作步骤（1）挑选生长肥大的3龄幼虫置于滴有生理盐水的载玻片上，用解剖针（或镊子）拉取唾腺，尽量把脂肪及其他杂物剥离干净。（2）用滤纸吸去多余的生理盐水，立即滴加1mol/L HCl于腺体上，解离时间设置了3个不同的时间，分别为3min、15min、30min，吸水纸吸去HCl，再滴加一滴蒸馏水轻轻冲洗，小心吸干。（3）滴加1～2滴改良苯酚品红染液，染色10～15min。（4）盖上盖玻片，上方覆盖一张滤纸，用大拇指用力按压，使唾腺染色体充分展开，便于观察。（5）在低倍镜下选择唾腺细胞多且染色体分散好的视野，换高倍镜仔细观察。

2　结果与分析

此方法与传统方法相比较，改进的地方有：

（1）在拉取唾腺时，要尽量选择肥大的幼虫，比较好固定，其唾腺也比较大。在实际操作过程中，实验所用的解剖针的针头一般较粗，往往不易固定住幼虫的头部，可以用镊子加以辅助将其固定住拉取唾腺。还可以用注射器及针头操作，将幼虫头部固定，拉取唾腺。

（2）与传统方法相比较，此次实验增加了解离时间。解离时间梯度为：3min、15min、30min。其中15min和30min2个组别所制作出来的片子染色体都伸展的很开，清晰可见，效果比传统的3min要好得多（图1）。

（3）压片的时候，要保证染色液充满整个盖玻片再用力去压，这样易于染色体臂的伸展。

（4）整个操作过程中，要让唾腺细胞要处于湿润的环境中，否则唾腺易干粘附在载玻片上。

（5）在给学生上实验课时，先用保存完好的果蝇死虫给学生练习基本操作，熟练后，用新鲜的活虫进行实验。死虫材料充分，便于学生反复练习，但虫体的弹性很差，不易拉取到完整的唾腺染色体，但新鲜活虫的身体弹性非常好，很方便得到完整的唾腺染色体，2种材料结合使用，以利于高效高质量地完成唾腺染色体制片。

图1　果蝇唾腺染色体不同解离时间制片

［1］孙永林，李运书.观察果蝇唾液腺染色体的实验改进［J］.生物学教学，2005，30（9）：49.

［2］龚慧明.果蝇唾液腺染色体制片应注意的问题［J］.生物学教学，2007，32（10）：27.

［3］郝大翠，姚明镜，刘焰，等.果蝇唾液腺染色体试材准备及观察方法的改进［J］.生物学通报，2010，45（4）：48-49.

［4］饶友生，柴学文，王樟凤.一种改进的果蝇唾液腺染色体装片制作方法［J］.生物学通报，2014，49（5）：44-46.

［5］薛小桥，曾庆韬，杨勇.一种易于掌握的果蝇唾腺染色体制片方法［J］.实验室研究与探索，2000，5：108-112.

［6］李瑶.果蝇唾腺染色体制片中4种染色方法的初探［J］.中国科教创新导刊，2012（10）：25-28.

（责编：张宏民）

An Improved Method for Drosophila Salivary Gland Chromosome

Yu You et al.
（College of Life Science，South-Central for Nationalities，Wuhan 430074，China）

Drosophila salivary gland chromosome sectioning observation is one of the main contents of genetics experiment in universities，but it is often difficult to get ideal production for the students who followed the traditional production methods，which often need large amount of living material preparation and student section glands.According to the long-term teaching practice，some improvement of the experiment was made.In the end，the drosophila salivary gland chromosomes of each arm can be better to stretch，easy to be observed and good experimental results are obtained.

Drosophila salivary gland chromosome；Dissociation time；Genetics experiments

Q311

A

1007-7731（2016）09-29-02

湖北省本科高校“专业综合改革”试点项目（GJZ15006）。

余优（1994-），女，湖北武汉人，研究方向：生物技术。*通讯作者

2016-04-15