陈永超，齐怀廷，王小晶，李　强，刘华伟

(西北农林科技大学 生命科学学院，陕西 杨陵 712100)



田菁茎瘤固氮根瘤菌对小麦叶组织的促生作用研究

陈永超，齐怀廷，王小晶，李强，刘华伟*

(西北农林科技大学 生命科学学院，陕西 杨陵 712100)

利用GFP标记的田菁茎瘤固氮根瘤菌(AzorhizobiumcaulinodansORS 571)侵染露白24 h的小麦种子，分别在侵染后0、6、12、24、48、72和96 h采样，利用实时荧光定量PCR方法检测小麦体内6条与促生作用相关miRNAs(miR156、miR159、miR160、miR167、miR168和miR403)的表达模式，检测其中3条miRNAs(miR159、miR167和miR168)的靶基因表达模式；以接菌8 d 的小麦样品做切片，利用激光共聚焦显微镜检测小麦叶部田菁茎瘤固氮根瘤菌的分布，并测定小麦的生理指标。结果显示：(1)田菁茎瘤固氮根瘤菌侵染小麦后能够在叶片边缘部位定殖。(2)小麦叶片中与促生作用相关的6条miRNAs出现了不同程度变化，在12～24 h到达其峰值，随后逐渐下降，其中miR159在峰值时的表达量为初始表达量的2.88倍。(3)3条miRNAs的靶基因表达模式与相应miRNA表达模式相对应，但并不严格。(4)生理指标测定结果显示，接种田菁茎瘤固氮根瘤菌对小麦叶片产生明显的促生作用，其中叶鲜重在96 h的变化与对照差异极显著。研究表明，接种的田菁茎瘤固氮根瘤菌能够到达小麦叶组织，对小麦叶片的生长产生明显的促生作用，其中miRNAs在促生过程中发挥重要作用。

小麦；田菁茎瘤固氮根瘤菌；促生作用；miRNA

根瘤菌是能与豆科寄主共生，形成根瘤并固定空气中的氮气供植物营养的一类杆状细菌。田菁茎瘤固氮根瘤菌(AzorhizobiumcaulinodansORS 571)属于固氮根瘤菌属，在其天然寄主豆科植物田菁(Sesbaniarostrata)的根部和茎部结瘤固氮，共生固氮效率高，且对氧的要求低于其他根瘤菌，是研究根瘤菌与非豆科植物相互作用的理想材料[1-2]。……