牛整合素β1亚基在COS-7细胞中的真核表达
2016-09-02李敏湘漳州卫生职业学院漳州363000
李敏湘 漳州卫生职业学院漳州363000
牛整合素β1亚基在COS-7细胞中的真核表达
李敏湘漳州卫生职业学院漳州363000
整合素是由18种α亚基和8种β亚基在细胞表面形成的异型二聚体。研究发现,整合素β1亚基是粘附分子家族主要成员,对多种细胞的存活、扩增、迁移有重要作用。本研究通过设计针对牛整合素β1亚基的特异性引物,将其克隆到真核表达载体pEYFP-C1上,构建pEYFP-C1-β1重组表达质粒,经PCR和酶切鉴定符合试验预期的阳性重组质粒与脂质体按照1:1.5比例共转染COS-7细胞,48 h后可见阳性重组质粒共转染COS-7细胞出现荧光信号。结果表明,本研究成功构建出具有生物学活性的牛整合素β1亚基,为研究牛整合素β1亚基的生物学功能奠定基础。
牛整合素β1亚基真核表达鉴定
整合素是细胞粘附分子家族中的一员,该家族的粘附分子主要介导细胞与细胞外基质(如纤连蛋白、纤维蛋白原、胶原蛋白等)的粘附。研究发现,整合素家族受体不仅存在于人类,亦存在于其他脊椎动物中。整合素广泛分布于各种组织,在纤维母细胞、上皮细胞、内皮细胞、肝细胞、角质细胞、白细胞及血小板均有表达[1-3]。
整合素是由18种α亚基和8种β亚基在细胞表面形成的异型二聚体,可以形成24种整合素。研究发现,按照β亚基的不同可将其分为8个亚组:β1~β8亚基。整合素β1与细胞增殖与分化、细胞间信号转导、血管的发生以及肿瘤的发生等生物学功能相关[4-6]。本研究针对牛整合素β1基因序列设计特异性引物,并在上下游引入Xho I和BamH I酶切位点,将其克隆到真核表达载体pEYFP-C1构建真核表达重组质粒,与脂质体共转染COS-7细胞,发现其有较好的生物学活性,可为进一步研究牛整合素β1基因的生物学功能奠定基础。……
