曹栩菡, 黄小军

(1 四川化工职业技术学院，四川　泸州　646000；2 国家酒类及加工食品质量监督检验中心，四川　泸州　646000)



GC/ECD测定白酒中的邻苯二甲酸酯类化合物*

曹栩菡1, 黄小军2

(1 四川化工职业技术学院，四川泸州646000；2 国家酒类及加工食品质量监督检验中心，四川泸州646000)

建立了液液萃取-气相色谱法测定白酒样品中16种邻苯二甲酸酯的方法。方法表明16种邻苯二甲酸酯化合物能得到有效分离；在0.4～5 mg·L-1范围内，16种邻苯二甲酸酯的线性相关系数R2均大于0.996；加标回收实验表明，回收率在86.3%～99.0%之间，相对标准偏差2.4%～7.1%；检出限低于0.10 mg·kg-1。该方法具有分离度好，较宽的线性范围，简单快速等优点，能够满足白酒中邻苯二甲酸酯类化合物的日常检测。

邻苯二甲酸酯类；气相色谱法；白酒

自2012年11月19日酒鬼酒被曝含邻苯二甲酸酯超标以来，邻苯二甲酸酯类化合物成为白酒产品质量关注的焦点。邻苯二甲酸酯(phthalate esters，PAEs)又称酚酞酸，化学性质稳定难降解，大多是无色透明的油状液体，低沸点、高挥发、强吸附性。PAEs主要用作塑料的增塑剂，增大产品的可塑性和提高产品的强度，也可用作农药载体，驱虫剂、化妆品、香味品、润滑剂和去泡剂的生产原料。多数邻苯二甲酸酯类物质对人具一定的毒性，且危害多种多样，比如致癌性、致畸性以及免疫抑制性，其中尤以造成人体生殖功能异常最为引人注目，他们在人体和动物体内，发挥着类似雌性激素的作用，干扰内分泌，使男子精液量和精子数量减少，精子运动能力低下，精子形态异常等，现已将其归为环境雌激素类物[1-3]。

目前，邻苯二甲酸酯的检测有GC法[4-6]和GC-MS法[7-8]。GC-MS具有定性能力强，前处理简单，干扰小，灵敏度高等优点，是现行国标的主要方法。但是对于生产企业在生产过程中的检测，GC相对于GC-MS，具有使用成本低，易于维护，稳定性和重现性好等优点。本文采用预加热除去白酒中低沸点的醇类和酯类，然后以正己烷提取，GC/ECD 法测定，建立了液液萃取-气相色谱法测定白酒样品中邻苯二甲酸酯类的方法。该方法具有分离度好，较宽的线性范围，简单快速等优点，能够满足白酒中邻苯二甲酸酯类化合物的日常检测。

1　材料与方法

1.1试剂

除特别说明外，本实验中所用水均为超纯水，试剂均为色谱纯。

正己烷(HPLC)，成都科龙化工试剂厂；氯化钠(AR)，成都科龙化工试剂厂；16种邻苯二甲酸酯混合标准溶液(1000 mg·L-1)：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸二环己基酯(DCHP)、邻苯二甲酸(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二苯酯(DPhP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)；以上标准均购置于上海安谱科学仪器有限公司。

标准使用液：将标准溶液用正己烷稀释至0.4，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mg·L-1的标准系列溶液备用。

1.2仪器

气相色谱仪(7890A, 附ECD检测器)，Agilent；石英毛细管柱(HP-5, 30 m×0.32 mm×0.25 μm)，Agilent；分析天平(BS224S型)，赛多利斯科学仪器公司；恒温水浴锅(HH-S型)，金坛市医疗仪器厂。

1.3实验方法

1.3.1样品前处理

分别采用(A)(B)两种方法处理试样：

(A)称取5 mL酒样于10 mL比色管中，加入2 mL正己烷和少量氯化钠，振荡1 min，静置分层，取上清液进行色谱分析。

(B)称取5 mL酒样于10 mL比色管中，置于沸水浴上加热至1 mL左右，取出冷却后补水至5 mL，加入2 mL正己烷和少量氯化钠，振荡1 min，静置分层，取上清液进行色谱分析。

1.3.2色谱条件

载气：高纯N2(99.999%)；

进样量：1 μL，不分流进样；

进样口温度：250 ℃；隔垫吹扫流量：3 mL·min-1；吹扫流量：20 mL·min-1，开始等待时间2 min；

柱流量：1 mL·min-1；

柱箱升温程序：初始温度60 ℃，保持1 min，以20 ℃·min-1升温至220 ℃，保持1 min，再以5 ℃·min-1升温至280 ℃，保持2 min，全程共计24 min；

检测器温度：300 ℃；尾吹气N2，流速：20 mL·min-1。

2　结果与讨论

2.1色谱分离效果

色谱条件参考GB/T 21911-2008方法中的色谱条件，16种邻苯二甲酸酯得到完全分离(见图1)，完全满足检测需求。

图1　邻苯二甲酸酯混标的气相色谱图

2.2方法线性、回收率和精密度

配制浓度为0.4～5.0 mg·L-1的混合标准溶液，依次进样测定，以所测得的峰面积对应浓度进行线性回归，各组分的回归方程和相关系数见表1。由表1可看出，在0.4～5.0 mg·L-1的较宽浓度范围内，采用GC/ECD 法测定邻苯二甲酸酯类化合物，标准曲线线性好，线性相关系数R2均大于0.996。按3倍信噪比计算检出限，16种邻苯二甲酸酯的检出限都低于0.10 mg·kg-1，DBP的检出限低于0.05 mg·kg-1。

称取白酒样品，按0.3 mg·kg-1水平添加，平行做3次。结果表明，16种邻苯二甲酸酯平均回收率在86.3%～99.0%之间，相对标准偏差为2.4%～7.1%。

表1　方法的回收率，精密度和线性相关系数(n=3)

2.3样品测定结果

图2　前处理方法(A)测得的样品色谱图

图3　前处理方法(B)测得的样品色谱图

样品分别按前处理方法(A)和(B)进行处理，以相同的色谱条件进行色谱分析，色谱图见图2、图3。从图2可以看出色

谱峰数目众多，干扰严重，干扰峰主要集中在10 min前。这说明白酒中成分众多，直接液液萃取较多低沸点的醇和酯进入正己烷相，对邻苯二甲酸酯的检测带来干扰。图3表明通过预先加热除去酒中低沸点物质后，样品色谱峰的数量大大减少，分离较好，且回收率与加热前没有显著差异。

3　结　论

预先加热除去白酒中低沸点的醇类和酯类，然后以正己烷提取邻苯二甲酸酯，GC/ECD 法测定。在0.02～5 mg·L-1范围内，16种邻苯二甲酸酯线性良好，R2大于0.996；加标回收实验表明，16种邻苯二甲酸酯回收率在86.3%～99.0%之间，相对标准偏差2.4%～7.1%；检出限低于0.10 mg·kg-1。该方法分离度好，具有较宽的线性范围，简单快速等优点，能够满足白酒中邻苯二甲酸酯类化合物的日常检测。

[1]刘慧杰,舒为群.邻苯二甲酸酯类化合物的毒理学效应及对人群健康的危害[J].第三军医大学学报,2004,26(19):1178-1781.

[2]林兴桃,王小逸,任仁.环境内分泌干扰物—邻苯二甲酸酯的研究[J].环境污染与防治,2003,25(5):286-288.

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[4]王思汉,温志友,叶晓亮.GC-ECD测定水体中邻苯二甲酸酯类化合物[J].环境科学技术,1991,4(3):25-29.

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[7]国家质量监督检验检疫总局.GB/T 21911-2008 食品中邻苯二甲酸酯的测定[S].北京:中国标准出版社,2008.

[8]国家质量监督检验检疫总局.GB/T 21928-2008 食品塑料包装材料中邻苯二甲酸酯的测定[S].北京:中国标准出版社,2008.

Determination of GC/ECD Phthalic Acid Esters Compounds in Liquor*

CAOXu-han1,HUANGXiao-jun2

(1 Sichuan Vocational College of Chmical Technology, Sichuan Luzhou 646000;2 China National Quality Supervision and Inspection Centre for Alcoholic Beverage Products and Processed Food, Sichuan Luzhou 646000, China)

The method of liquid-liquid extraction gas chromatography to measure phthalic acid esters content in liquor was developed which was effective to enrich sixteen species of phthalic acid ester compounds. At the concentration of 0.4～5 mg·L-1, all the linearity of the measurement were good with the coefficients of more than 0.996, the recovery were founded to be in the range of 86.3%～99.0%, the relative standard differences were 2.4%～7.1%, and the detection limit in test were lower than 0.10 mg·kg-1. The analysis manifests that the method is convenient to operate, rapidly, high resolution and of broad linear range, in routine analysis, can be capable for the determination of phthalic acid ester compounds in liquor.

phthalate esters; gas chromatography; liquor

四川化工职业技术学院2015年度教研科研课题 (No: SCHY15B04)。

曹栩菡(1987-)，女，硕士，助教。

O657.7, O657.63

B

1001-9677(2016)02-0101-03