体外血脑屏障的建立
2016-08-31李联平蒋莹
山东医药 2016年27期
关键词:模型
李联平,蒋莹
(1 海军总医院,北京100048;2 北京市肛肠医院)
·基础研究·
体外血脑屏障的建立
李联平1,蒋莹2
(1 海军总医院,北京100048;2 北京市肛肠医院)
目的利用大鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞于体外建立血脑屏障。方法分别取10只出生7~10 d、2只出生1~3 d的SD大鼠,断头处死后取脑组织,分别分离培养脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞,采用免疫细胞染色方法鉴定脑微血管内皮细胞,以脑微血管內皮细胞因子Ⅷ作为标记抗原,以神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)作为标记抗原鉴定星型胶质细胞。以非接触方式共培养脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞的方法建立体外血脑屏障。接种12 d将电极插入待测Transwell小室(培养模型)、细胞培养液、空白Transwell小室(细胞培养液为媒介)。测定跨膜电阻、测算荧光素钠渗透系数(Pe),衡量模型完整性。结果接种12 d时,模型、细胞培养液、空白Transwell小室的电阻值分别为180、64、112 Ω/cm2。接种12 d时模型Pe为(4.67±0.4)×10-6cm/s。结论成功建立体外血脑屏障,屏障效应较好、完整性较高。
血脑屏障;细胞屏障;动物实验;大脑;脑微血管内皮细胞;星型胶质细胞
血脑屏障是血液与脑组织间的一种特殊屏障,由微血管内皮、基膜和星型胶质细胞等构成,其中内皮细胞是血脑屏障的主要结构。血脑屏障具有保证脑的内环境高度稳定、保护中枢神经系统的活动机能、阻止微生物和毒素等异物侵入脑组织的功能。以往在体血脑屏障动物实验存在动物脑组织内药物浓度较低无法准确测量、动物体内影响因素较多等缺点。……
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