吕若芸,　王　辉,　陈　忱,　张世雄,　张晓楠,　曹晨华,　魏敬双

华北制药集团新药研究开发有限责任公司, 抗体药物研制国家重点实验室, 石家庄 050015



N-糖链切除对重组抗狂犬病毒单克隆抗体中和活性的影响

吕若芸§,王辉§,陈忱,张世雄,张晓楠,曹晨华,魏敬双*

华北制药集团新药研究开发有限责任公司, 抗体药物研制国家重点实验室, 石家庄 050015

重组抗狂犬病毒单克隆抗体是一种全人源的抗病毒感染单抗，主要用于狂犬病毒暴露后预防。采用糖苷酶处理2种重组抗狂犬病毒单克隆抗体Mab1、Mab2水解切除N-糖链，通过糖染色和毛细管电泳检测确定N-糖链酶解程度，利用快速荧光灶抑制试验检测其中和活性，分析N-糖链切除对该单抗中和活性的影响。结果显示，N-糖链切除后抗体中和活性无明显变化。说明N-糖链对这两株抗狂犬病毒单抗的体外中和活性不是必须的结构成分。

重组抗狂犬病毒单克隆抗体；N-糖链切除；毛细管电泳；中和活性

重组单克隆抗体是通过蛋白质突变和修饰而形成的复杂混合异构物，其结构和功能复杂。在对抗体糖基化的研究中人们发现， N糖基化是其最常见、复杂的蛋白质翻译后修饰之一。通常IgG的每个重链Fc区靠近铰链处的CH2结构域均有一个N-连接的糖基化位点(Asn297)，该位点十分保守[1,2]，其可通过单价链接形成双角N-糖链。在CH2区N-糖链协助维持一种开放的马蹄形构象，有利于促进与Fcγ受体的互作[3]。研究表明糖链在维持重组单克隆抗体的正常结构、功能以及其生物学特性(识别抗原触发免疫系统细胞、调节信号活性等)和物理化学性质(溶解度、蛋白质折叠等)中发挥着重要作用，不同糖型对其功能和活性的影响不完全相同[4～6]；……