赵红玲，李松涛，邓淑华，尹志峰，王良友

(承德医学院 河北省中药研究与开发重点实验室，河北 承德 067000)



生长抑素类似物TT-232的合成

赵红玲，李松涛，邓淑华，尹志峰，王良友

(承德医学院 河北省中药研究与开发重点实验室，河北 承德 067000)

摘要：采用多肽固相合成法，以Rink Amide树脂为载体、Fmoc保护的氨基酸为原料、DIC/HOBt为缩合体系，按照生长抑素类似物TT-232的氨基酸序列从C端向N端顺次偶联，肽树脂裂解得到还原型TT-232粗品，环化后再经制备型RP-HPLC纯化，得到纯度为98%的TT-232。

关键词：生长抑素类似物TT-232；固相合成；Rink Amide树脂

1实验

1.1试剂与仪器

Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Tyr(OtBu)-OH、Fmoc-D-Phe-OH，成都诚诺新技术有限公司；RinkAmide树脂(替代度0.50mmol·g-1)；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、1-羟基苯并三唑(HOBt)、N,N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，吉尔生化(上海)有限公司；冰乙醚、二氯甲烷(DCM)、三氟乙酸(TFA)、1,2-乙二硫醇(EDT)、苯甲硫醚、苯甲醚均为分析纯；乙腈为色谱纯；氨基酸标准品。

图1　TT-232的结构式1　The structural formula of TT-232

Agilent 1200型反相高效液相-ESI型质谱联用仪；Newstyle NP7000型反相高效半制备液相色谱仪；LC98-I AAA型氨基酸分析系统；HDFD-3 PSA型制氮机；Christ Alpha 1-4 LD型冻干机；TDL-40B型高速大容量离心机；AR224CN型分析天平；Heal Force Easy20型纯水机。

1.2方法

1.2.1还原型TT-232的合成[4]

1.2.1.1Fmoc-Thr-Rink Amide的制备

准确称取Rink Amide树脂4.002 g(2 mmol)投入固相合成反应柱中，加入20 mL DMF溶胀30 min，抽干液体；20 mL DMF洗涤一次。分别加入20 mL脱保护试剂DBLK(20%哌啶的DMF溶液)，时间分别是10 min和5 min，茚三酮检测(Kaiser法)树脂为紫红色，证明Fmoc脱除完全，可进行偶联反应。称取Fmoc-Thr(tBu)-OH 2.385 g(6 mmol)、DIC 1.114 mL(7.2 mmol)和HOBt 0.972 g(7.2 mmol)，在20 mL DMF中充分溶解后加入到树脂中，连续鼓入N2，反应2 h后进行茚三酮检测，树脂为亮黄色，证明反应充分。抽滤去除反应液。20 mL DMF洗涤，脱保护。

1.2.1.2全保护还原型TT-232肽树脂的合成

按照TT-232氨基酸序列……