刘红梅，胡尚连*，曹 颖，卢学琴，徐 刚，龙治坚，任 鹏

(1.西南科技大学生命科学与工程学院，绵阳 621010；2.四川省生物质资源利用与改性工程技术研究中心，绵阳 621010)

慈竹WRKY转录因子基因克隆及其胁迫诱导表达

刘红梅1,2，胡尚连1,2*，曹 颖1,2，卢学琴1,2，徐 刚1,2，龙治坚1,2，任 鹏1,2

(1.西南科技大学生命科学与工程学院，绵阳 621010；2.四川省生物质资源利用与改性工程技术研究中心，绵阳 621010)

为了解慈竹WRKY生物学功能以及通过基因工程手段改良竹类植物。利用已获得慈竹转录组数据，克隆获得2条WRKY转录因子,分别命名为BeWRKY1 (GenBank：KJ462124)和BeWRKY2 (GenBank：KJ462125)，两者分别编码189和295个氨基酸残基。序列分析表明，两者编码的蛋白均含有一个完整的WRKY superfamily的保守结构域。BeWRKY1属于Ⅱc亚家族；BeWRKY2则与TaWRKY16和AtWRKY39等聚为一枝，属于Ⅱd亚家族。定量PCR分析表明，BeWRKY1和BeWRKY2分别在茎和完全展开叶中具有较高表达量。200mmol·L-1NaCl和20% PEG 6000胁迫处理激活了BeWRKY1表达，却减少了BeWRKY2的转录积累。结果表明BeWRKY1可能短时间内迅速参与逆境响应；BeWRKY2对干旱和ABA胁迫伤害更为敏感，而可能不参与高盐类胁迫保护反应。

慈竹；WRKY；克隆；生物信息学分析；胁迫诱导

WRKY蛋白是植物特有的转录因子家族[1]，含有高度保守的WRKY域的锌指蛋白，其保守域约由60个氨基酸残基组成[2]。根据WRKY结构域和锌指结构的数量将其分为Ⅰ类、Ⅱ类、Ⅲ类[3]。Ⅰ类含有两个WRKY结构域，Ⅱ类和Ⅲ类虽都含有一个WRKY结构域，但锌指结构不同。其中的Ⅱ类还根据不同的序列特征分为5个亚群[4]。目前已从拟南芥[5]、水稻(Oryzasativa)[6]、小麦(Triticumaestivum)[7]、(Solanumlycopersicum)[2]、毛竹(Phyllostachysheterocyclacv.Pubescens)[8]等植物中克隆得到大量的WRKY转录因子，但在慈竹中尚未见报道。WRKY蛋白具有快速、瞬时、具组织特异性诱导表达特性。……