香蕉细菌性软腐病菌细胞壁降解酶pelD、pelE基因的克隆表达及活性分析
2016-08-06任小平蒲小明沈会芳张景欣林壁润
任小平,蒲小明,沈会芳,张景欣,林壁润
(1.广东省农业有害生物预警防控中心,广东 广州 510500,2.广东省农科院植物保护研究所,广东 广州 510640)
香蕉细菌性软腐病菌细胞壁降解酶pelD、pelE基因的克隆表达及活性分析
任小平1,蒲小明2,沈会芳2,张景欣2,林壁润2
(1.广东省农业有害生物预警防控中心,广东 广州 510500,2.广东省农科院植物保护研究所,广东 广州 510640)
细胞壁降解酶与植物病害症状有重要的相关性。根据已知软腐病细菌细胞壁降解酶基因序列,设计两对特异性引物,对香蕉细菌性软腐病菌进行PCR克隆,获得具有完整阅读框的基因pelD、pelE序列。通过构建重组表达载体pET28b(+)-pelD和pET28b(+)-pelE,重组表达载体转化子在IPTG诱导下,经SDSPAG分析,获得了pelD和pelE的表达蛋白。将两种表达蛋白接种于7~8片叶的粉蕉假茎和离体叶片上,发现接种pelE表达蛋白的粉蕉假茎和叶片出现了腐烂症状,但接种pelD表达蛋白没有引起发病症状。
香蕉细菌性软腐病菌;克隆;表达;活性分析
任小平,蒲小明,沈会芳,等.香蕉细菌性软腐病菌细胞壁降解酶pelD、pelE基因的克隆表达及活性分析[J].广东农业科学,2016,43(5):96-100.
狄克氏属细菌(Dickeya)可为害作物造成严重系统性维管束病害,特别对香蕉、玉米、马铃薯等为害极大[1]。香蕉细菌性软腐病菌(Dickeya zeae)[2]是我国进境检疫性有害生物,2009年首次在广东报道了香蕉细菌性软腐病的发生与危害[3],发现该病在粉蕉种植区发病株率初期为20%~30%,后期严重可达90%以上甚至造成绝收,对香蕉生产造成严重损失。目前国内在江苏、上海、浙江、福建、广东[4]、湖南、湖北、广西、云南[5],台湾种植的百合[6]和安徽等地的水稻、蝴蝶兰、马蹄莲等作物上有报道由Dickeya病原菌引起的病害。……
