水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的克隆及原核表达
2016-08-05陈亚红刘早利王春台刘新琼
陈亚红,刘早利,王春台,刘新琼
(中南民族大学生命科学学院/武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室/生物技术国家民委重点实验室,湖北 武汉 430074)
水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的克隆及原核表达
陈亚红,刘早利,王春台,刘新琼
(中南民族大学生命科学学院/武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室/生物技术国家民委重点实验室,湖北 武汉 430074)
水稻OsSSI2基因负调控水稻的抗病反应,为了研究该基因的抗性机理,构建pGEX-6P1-OsSSI2原核表达载体,转化大肠杆菌BL21细胞后利用IPTG诱导外源蛋白表达并优化表达条件,使用SDS-PAGE和Western Blot检测分析表达产物。结果表明:成功构建了pGEX-6P1-OsSSI2原核表达载体后进行原核表达,在IPTG浓度为0.3 mmol/L,温度为25℃,诱导表达7 h,通过SDS-PAGE和Western Blot检测发现OsSSI2蛋白的可溶性表达量最多,为进一步研究水稻OsSSI2蛋白的抗性机理奠定了基础。
水稻;OsSSI2基因;原核表达载体;诱导表达
陈亚红,刘早利,王春台,等.水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的克隆及原核表达[J].广东农业科学,2016,43(4):33-37.
稻瘟病是由真菌Magnaporthe oryzae 引起的水稻病害,是全球最具影响力和破坏力的水稻病害之一[1]。目前,稻瘟病的防治主要采用化学防治和抗病新品种培育两种途径。化学防治通常成本高、效果差而且污染环境。因此发掘水稻自身的广谱抗性基因资源,培育持久高抗品种,是最经济有效的病害控制措施[2-3],但对于水稻的广谱抗性机理不甚清楚。
植物在抗病过程中通过激活不同的防御通路来对抗病原体感染,其中水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)和乙烯(ET)等植物激素是诱导植物抗病反应的重要的信号分子[4-5]。……
