熊　波　蔡　琳　陈应忠　周名纲　丁寻实　夏　茏（成都市第三人民医院心血管内科　成都　610031）

胱抑素C及同型半胱氨酸与冠心病病变程度相关性研究

熊波蔡琳陈应忠周名纲丁寻实夏茏（成都市第三人民医院心血管内科成都610031）

摘要：目的：观察不同病变程度的冠心病患者血浆胱抑素C（Cyst C）和同型半胱氨酸（HCY）水平，研究Cyst C及HCY水平与冠脉狭窄病变的临床关系。方法：选取2015年9月～2016年2月我院心内科收治的冠心病患者134例。根据冠脉造影结果分为单支病变组45例、双支病变组40例和三支病变组49例。根据冠状动脉Gensini评分结果分为轻度狭窄组44例、中度狭窄组46例和重度狭窄组44例。同时选择疑似冠心病患者42例为对照组。分别用ELISA法和高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography）检测各组受试者血浆中的Cyst C和HCY浓度，并应用Pearson进行分析。结果：随着冠脉病变支数的增加和病变狭窄程度的加重，患者的血浆Csyt C和HCY水平均增高（P＜0.05）。三支病变组、双支病变组、单支病变组之间血浆Csyt C和HCY水平存在差异（P＜0.05）；重度狭窄组、中度狭窄组、轻度狭窄组之间血浆Csyt C和HCY水平同样存在差异（P＜0.05）。患者的血浆Cyst C 和HCY水平均与冠脉Gensini积分呈正相关（r=0.514，0.476，P＜0.01），血浆Cyst C与HCY水平呈显著性正相关（r=0.743，P＜0.01）。结论：冠心病患者血浆Cyst C和HCY水平升高，且随着冠脉病变支数的增加及病变狭窄程度的加重而逐渐增高，同时与冠状动脉Gensini评分正相关。因此临床上联合检测患者血浆Cyst C及HCY水平对于冠状动脉狭窄病变程度有一定的初步预测价值。

关键词：胱抑素C同型半胱氨酸 冠心病 Gensini评分

动脉粥样硬化和粥样斑块是冠心病的主要病理表现，具体发生机制尚不完全明确。近年来研究表明，Cyst C和HCY可能参与炎症反应和动脉粥样硬化斑块的形成，与心血管疾病的发生发展密切相关［1］。本文收集134例冠状动脉造影患者的临床资料，评价Cyst C及HCY与冠脉病变及其严重程度是否相关，探讨联合检测Cyst C及HCY水平对于预测冠脉病变程度的临床价值。

1资料与方法

1.1一般资料：选取成都市第三人民医院心内科2015年9月～2016年2月住院的冠心病患者（以第9版Braunwald《心脏病学》制定的诊断标准）134例，并经冠状动脉造影（CAG）证实至少有一支冠状动脉（左主干、左前降支、左回旋支、右冠状动脉）及其主要分支动脉血管内径狭窄≥50%。其中男性82例，女性52例，平均年龄（59.45±9.45）岁。根据冠状动脉病变累及支数分为单支病变组（45例）、双支病变组（40例）及三支病变组（49例）。根据美国心脏病协会（AHA）规定的改良Gensini积分系统［2］对每支病变血管狭窄程度进行定量评分。按Gensini积分情况分为三组，即轻度狭窄组（积分＜30分）44例、中度狭窄组（积分30～90分）46例、重度狭窄组（积分＞90分）44例。选取42例CAG检查证实冠状动脉＜50%狭窄的疑似冠心病患者为对照组，其中男性28例，女性14例，平均年龄（57.32±8.41）岁。所有受试者签署知情同意书，并经医院伦理委员会批准。并排除风湿性心脏病、肺源性心脏病等其他心血管病；严重肝肾功能不全者；妊娠、哺乳期妇女及合并有急慢感染病史、恶性肿瘤等；近6个月有手术等。

1.2检测方法：应用ELISA双抗体夹心法检测血浆Cyst C水平，高效液相色谱法检测血浆HCY水平。

1.2.1检测Cyst C（双抗体夹心法）：①取5mL空腹静脉血注入EDTA抗凝管，以3000r/min离心15min分离血浆，置于-80℃冰箱。②稀释与加样标准品、置37℃温育30min、每个孔加入酶标试剂50μL，空白孔除外。③37℃温育30min、每个孔先加入显色剂A50μL，再加入显色剂B50μL，震荡混匀，37℃避光显色15 min。④每个孔加入终止液50μL，450nm波长依序测量各孔的OD值并计算。

1.2.2检测HCY（高效液相色谱法测定）：①采集抗凝血液，分离出血浆；②将含有硼氢化钠、二甲基亚砜和氢氧化钠的溶液，含有EDTA和二巯基苏糖醇的溶液，以1-辛醇、盐酸溶液共同加入标本，室温下混匀，静置1min；③加入含有衍生化试剂bromobimane的缓冲液，混匀1min后进样；④色谱柱采用150mm× 4.6mm的反相C18柱，进样前采用pH3.6的硝酸铵和甲酸铵缓冲液平衡，然后用乙腈进行梯度洗脱，半胱氨酸和同型半胱氨酸的保留时间分别为3.76min、4.14min。

1.3统计学方法：应用SPSS17.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。相关分析应用Pearson分析其相关性。

2结果

2.1不同病变支数冠心病病例血浆Cyst C和HCY水平比较：单支病变组、双支病变组和三支病变组的血浆Cyst C和HCY水平均高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。三支病变组血浆Cyst C和HCY的浓度高于双支病变组和单支病变组（P＜0.05）；双支病变组血浆Cyst C和HCY的浓度均高于单支病变组，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1不同病变支数冠心病病例Cyst C和HCY水平比较

2.2冠脉不同狭窄程度组血浆Cyst C和HCY水平比较：各冠脉不同狭窄程度组血浆的Csyt C和HCY水平均高于对照组，随着冠脉狭窄程度的增加，Csyt C和HCY水平逐渐增高，任一组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2不同Gensini积分组Cyst C和HCY水平比较

2.3冠心病患者Cyst C和HCY水平与冠脉Gensi-ni积分的相关性：通过Pearson相关分析显示，Cyst C水平与冠脉Gensini积分呈正相关（r=0.521，P＜0.01），HCY水平与冠脉Gensini积分呈正相关（r=0.486，P＜0.01）。

2.4血浆Cyst C水平与HCY水平的相关性分析：经线性相关分析冠心病患者血浆Cyst C水平与HCY水平呈显著性正相关（r= 0.724，P＜0.01）。

3讨论

Cyst C主要来源于机体有核细胞中，无组织特异性，可持续、恒定地表达［3］。早期大量临床及实验室研究表明，Cyst C和HCY通过以下途径参与动脉粥样硬化的各个环节：①参与调控细胞内外蛋白质的分解，可引起细胞外基质和内弹性膜的降解增多，侵入内膜的单核巨噬细胞和血管平滑肌增多［4］；②可影响脂质代谢；③还通过参与炎症反应、影响中性粒细胞的迁移，增强中性粒细胞的趋化和吞噬能力，间接影响血管壁、细胞外基质生成和降解的平衡过程［5～6］；④直接损伤血管内皮细胞，从而启动血管内膜的炎症-纤维增生性反应［7～8］。而Cyst C是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员之一，可通过抑制半胱氨酸蛋白酶活性，减少HCY的分解，从而导致HCY过度表达和蓄积在动脉内膜损伤处［9～10］，因此Cyst C和HCY两者之间存在密切的联系。本次研究也证实冠心病组血浆Cyst C水平与HCY水平呈显著性正相关。

本次研究结果可见，冠心病患者不同病变冠脉支数组Cyst C和HCY浓度明显增加，且随着病变冠脉支数增加和冠脉狭窄程度加重，Cyst C和HCY水平逐渐升高，证实Cyst C和HCY与冠心病的发生、发展过程均有密切联系。因此，联合检测血浆Cyst C及HCY水平对于初步预测冠状动脉狭窄病变程度具有一定的临床价值，可增加样本量进一步研究血浆中Cyst C及HCY水平与冠心病的关系。另一方面，血浆Cyst C和HCY水平虽然与冠心病有着密切的联系，但Cyst C及HCY水平是作为冠心病的致病因子还是冠心病发生的一种伴随现象，还需深入研究。

综上所述，冠心病患者血浆Cyst C和HCY水平明显升高，随着病变支数的增加及狭窄病变程度而逐渐升高，联合检测血浆Cyst C及HCY水平可初步预测冠状动脉狭窄病变程度。

参考文献

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中图分类号：R541.4

文献标识码：B

文章编号：1672-8351（2016）07-0135-02

Abstract：Objective：To observe the plasmatic cystatin C（Cyst C）and homocysteine（HCY）levels of coronary artery disease（CHD）patients with different lesion extent，and explore the clinical predictive value of Cyst C and HCY on CHD lesions.Methods：134 patients in the department of Cardiology from September 2015 to February 2016 were selected.According to the results of coronary angiography，they were divided into single-vessellesion group（45 cases），double vessellesion group（40 cases），three-vessellesion group（49 cases）. According to the results of coronary Gensini score，they were divided into mild stenosis group（44 cases），moderate stenosis group（46 cases），severe stenosis group（44 cases）.42 CHD suspected cases were enrolled as the control group.The plasmatic cystatin C（Cyst C）and homocysteine（HCY）levels were measured by ELISA and HPLC，and their correlation was analyzed by Pearson.Results：The plasmatic Cyst C and HCY level of single-vessel lesion group，double-vessel lesion group and three-vessel lesion group were higher than the control group（P＜0.05）.three-vessel lesion group were higher than the two-vessel lesion group and single vessel lesion group （P＜0.05），two-vessel lesion group was higher than the single vessel lesion group（P＜0.05）.The plasmatic Cyst C and HCY level of mild stenosis group，moderate stenosis group and severe stenosis group were higher than the control group（P＜0.05）.severe stenosis group were higher than mild stenosis group and moderate stenosis group（P＜0.05），moderate stenosis group was higher than mild stenosis（P＜0.05）.the plasmatic cystatin C（Cyst C）and homocysteine（HCY）levels were positively correlated with coronary Gensini score（r= 0.514，0.476，P＜0.01），plasma Cyst C and HCY levels were positively correlated（r=0.743，P＜0.01）.Conclusions：Plasmatic Cyst C and HCY levels in patients with coronary heart disease increased significantly，they could increase gradually with the increase of lesion vesseland stenosis，and they were positively correlated with coronary Gensini score.Combined detection of plasmatic Cyst C and HCY levels can predict the lesion extent of coronary artery stenosis.

Key words：Cystatin C Homocysteine Coronary heart disease Gensini score