吴　　梦，刘作华，3，罗　　林，丁玉春，葛良鹏*，3（.重庆市畜牧科学院，重庆 荣昌 402460；2.农业部养猪科学重点实验室，重庆 荣昌 402460；3.养猪科学重庆市市级重点实验室，重庆 荣昌 402460）

利用改良电融合法制备杂交瘤细胞的试验探索

吴梦1，2，刘作华1，2，3，罗林1，丁玉春1，2，葛良鹏*1，2，3
（1.重庆市畜牧科学院，重庆 荣昌 402460；2.农业部养猪科学重点实验室，重庆 荣昌 402460；3.养猪科学重庆市市级重点实验室，重庆 荣昌 402460）

摘要：目的：运用改良电融合法提高杂交瘤的融合效率，以获得更多的杂交瘤克隆。方法：将SP2/0细胞和脾细胞分别用NHS_d_PEG24_biotin孵育30min，再将脾细胞用avidin孵育30min，然后将SP2/0细胞和脾细胞按1：5混合孵育15min后进行电融合，融合后的细胞用半固体培养基筛选单克隆。结果显示：用2×105个SP2/0细胞和1×106个脾细胞进行正常电融合，经半固体培养基筛选共获得6个单克隆，而用改良电融合法获得了20个单克隆。结论：利用改良电融合法能够增加异种细胞相互配对的几率，从而提高杂交瘤的融合效率，最终获得更多的杂交瘤细胞。

关键词：电融合；半固体培养基；杂交瘤

细胞融合产生杂交瘤细胞在生物技术和生物医药中扮演着重要的角色，并且已经广泛用于各个领域，其中最成功的就是利用杂交瘤生产单克隆抗体。近年来，融合技术的最新应用是将树突状细胞（DCs）与肿瘤细胞融合用于癌症的免疫治疗［1_2］。目前细胞融合主要有三种方法：病毒诱导细胞融合、聚乙二醇（PEG）诱导细胞融合和电脉冲诱导细胞融合。虽然病毒诱导的细胞融合通常能够得到较高的融合率，但由于病毒不稳定，容易污染杂交瘤细胞，因而在治疗应用中受到了很大限制。……