高俊霞，吕强

1.牡丹江医学院红旗医院，黑龙江 牡丹江 157011；2.穆棱市八面通林业局职工医院，黑龙江 穆棱 157500

大黄素对人肝癌HepG 2细胞迁移侵袭能力及E-钙黏蛋白、Slug蛋白表达的影响

高俊霞1，吕强2

1.牡丹江医学院红旗医院，黑龙江 牡丹江 157011；2.穆棱市八面通林业局职工医院，黑龙江 穆棱 157500

目的观察大黄素对人肝癌HepG2细胞迁移侵袭能力及E-钙黏蛋白（E-cadherin）、Slug蛋白表达的影响，探讨其相关作用机制。方法体外培养HepG2细胞，大黄素低、高剂量组分别加入10、20 μmol/L大黄素，阴性对照组加入等体积RPM I-1640培养液，阳性对照组加入10 μmol/L 5-氟尿嘧啶。分别采用细胞-基质黏附实验、划痕修复实验、Transwell小室体外侵袭实验观察HepG2细胞黏附率、迁移、侵袭能力；Western blot检测E-cadherin和Slug蛋白表达。结果与阴性对照组比较，大黄素低、高剂量组显著抑制HepG2细胞黏附率、迁移、侵袭能力，E-cadherin蛋白表达水平显著升高，Slug蛋白表达水平显著降低（P＜0.05，P＜0.01），并呈浓度依赖性。结论大黄素能明显抑制HepG2细胞迁移和侵袭能力，其机制可能与增强E-cadherin及抑制Slug蛋白表达有关。

大黄素；肝细胞癌；迁移；侵袭；E-钙黏蛋白；Slug蛋白

1 实验材料

1.1 细胞

人肝癌 HepG2细胞，哈尔滨医科大学第三附属医院消化内科惠赠。

1.2 药物及制备

大黄素购自中国食品药品检定研究院，批号140675-201410。1 mg大黄素溶于200 μL 0.1%二甲基亚砜（DMSO）溶液，溶解后依次加入7.4mL灭菌三蒸水、50 μL 5 mol/L NaOH溶液，过滤后溶液作为母液，浓度为500 μmol/L，-20 ℃冰箱保存备用，临用时以灭菌三蒸水稀释至所需浓度。

1.3 主要试剂及仪器

5-氟尿嘧啶（5-Fu），上海海普药厂，批号150073；DMSO，徐州试剂二厂，批号150217；牛血清白蛋白（BSA），PAA公司，批号715396；……