一种实验兔膝关节滑膜组织提取新方法
2016-07-27王俊伟陈利锋王华松王丽平湖北中医药大学针灸骨伤学院武汉430065广州军区武汉总医院武汉430060
中国比较医学杂志 2016年6期
关键词:实验
王俊伟,陈利锋,王华松,陈 芳,王丽平,刘 琴(.湖北中医药大学针灸骨伤学院,武汉430065;.广州军区武汉总医院,武汉 430060)
简 讯
一种实验兔膝关节滑膜组织提取新方法
王俊伟1,陈利锋2,王华松2,陈 芳2,王丽平2,刘 琴2
(1.湖北中医药大学针灸骨伤学院,武汉430065;2.广州军区武汉总医院,武汉 430060)
类风湿性关节炎(RA)典型病理表现之一为滑膜组织增生。成纤维样滑膜细胞(FLSs)在RA的发生、发展中发挥着重要作用。在原代FLSs体外培养过程中,滑膜组织提取成功与否是实验顺利进行的关键。以往兔膝关节滑膜组织提取大都是提起髌骨上下进行分离,在实验中我们发现将髌骨提起分离两侧及胫骨时需要将髌骨翻转,此时难以辨认关节囊内外层组织的解剖关系,致使分离困难,可能将纤维层混杂导致培养细胞纯度不高。本研究在此基础上进行改良,建立一种简单易行的提取方法并附图做详尽说明。
方法:取新西兰兔一只,耳缘静脉空气栓塞处死,75%酒精浸润双大腿皮肤5 min。沿踝关节切开皮肤至大腿根部,充分剥离皮肤,显露膝关节。将膝关节周围筋膜层剥离,扪及髌骨骨性标志。采取髌骨下极上缘0.5 cm处切开长约1 cm横行切口,离断髌腱,保留髌下脂肪垫作为识别滑膜组织标志。沿切口向内外侧髁游离,提夹关节囊层,必要时离断内外侧副韧带。仔细辨认关节囊内壁一层薄薄的组织,即为滑膜。助手辅助下仔细分离小心钳夹,剔出滑膜组织上的血液及脂肪组织。将取出滑膜组织置于EP管中(内含100 U/mL青霉素、100 mg/mL链霉素的PBS液)。……
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