常　卓，傅祥伟，朱士恩

(1.中国农业大学 动物科技学院，北京 100094；2.北京市畜牧总站，北京 100101)



基于表达谱芯片技术分析老龄化对小鼠卵母细胞发育能力的影响

常卓1，2，傅祥伟1，朱士恩1

(1.中国农业大学 动物科技学院，北京 100094；2.北京市畜牧总站，北京 100101)

摘要：探讨了生殖老化对小鼠卵母细胞后期发育及基因表达水平的影响。结果表明，与青年小鼠相比，老龄小鼠MII期卵母细胞经体外受精后早期胚胎原核形成的时间发生延迟(1 h)，囊胚发育率有显著差异(61.98% vs.70.95%，P<0.05)。提取老龄和青年CD1小鼠MII期卵母细胞总RNA，使用基因表达谱芯片对其进行分析。结果表明，生殖老化导致1 737个基因表达表现出显著差异，其中64.9%的基因表达上调，35.1%的基因表达下调，生殖老化导致Hdac10等基因产生极显著的表达差异，小鼠卵母细胞质量下降，最终影响其后期发育能力。

关键词：卵母细胞；生殖老化；减数分裂；基因表达；小鼠

生物体在机体其它器官老化前生殖机能就已开始退化，即发生生殖老化现象。与雄性哺乳动物不同的是，雌性哺乳动物在渡过其寿命的1/3时已发生生殖老化，生殖机能表现出显著下降，表现在卵母细胞的数量和质量上，如卵巢早衰、减数分裂中染色体分离异常以及线粒体功能障碍等[1]。而人们对于生殖老化影响卵母细胞后期发育的情况知之甚少。

Hamatani和Pan等人曾通过表达谱芯片技术分析青老年小鼠卵母细胞全基因组表达，但在杂交前使用RNA线性扩增的方法得到cRNA[2，3]。而本实验不进行RNA线性扩增，免去繁琐的扩增过程和扩增中可能会导致的核酸污染，更重要的是避免扩增不均一而放大或减小基因表达差异，最终得出不准确的结果。本实验主要研究生殖老化对小鼠卵母细胞后期发育潜力是否造成影响，并进一步以老龄和青年CD1小鼠MII期卵母细胞为实验材料进行基因表达谱分析，探索生殖老化影响卵母细胞后期发育的分子机理。……