王蕾++罗才林++徐德林+钱刚

摘要：Δ6-脂肪酸脱氢酶（Δ6 desaturase，D6D）是不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶。以高等植物千里光为材料，通过构建全长cDNA文库克隆得到脂肪酸脱氢酶基因（D6D），明确了D6D基因的氨基酸保守基元序列（conserved sequence motif，CSM）对蛋白质功能结构域的决定作用。结果显示，千里光D6D基因由466个氨基酸残基组成；预测蛋白分子量为53.40 ku，理论等电点为8.48；进化树和序列比对结果提示3个富含His的保守基元序列（HisⅠ-片段、HisⅡ-片段、HisⅢ-片段）在不同物种中表现出高度保守性；三维结构预测结果表明，D6D基因的保守结构域以及一个类似于细胞色素（cytochrome，cyt）b5的血红素结合区是形成底物结合部位和酶催化活性中心的结构基础。

关键词：千里光；脂肪酸脱氢酶（D6D基因）；保守基元序列（CSM）；三维结构

中图分类号： S567.23+9.01文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）06-0073-05

收稿日期：2015-11-03

基金项目：国家自然科学基金（31560087）；贵州省优秀科技教育人才省长基金（编号：黔省专合字2008-61号）。

作者简介：王蕾（1991—），女，黑龙江五大连池人，硕士研究生，主要从事药用植物分子遗传学研究。E-mail：1807840035@qq.com。

通信作者：钱刚，博士，教授，主要从事药用植物分子遗传学研究。E-mail：pengjiaqiong@163.com。脂肪酸脱氢酶是多不饱和脂肪酸合成途径中的关键酶，分为可溶性脱氢酶和膜结合脱氢酶，其中膜结合脱氢酶又可分为羧基定向的脂肪酸脱氢酶（“frond-end”脱氢酶）和甲基定向的脂肪酸脱氢酶[1]。脂肪酸脱氢酶结构上都有3个保守的组氨酸富集区，除此之外羧基定向的脱氢酶N端还有1个类似于细胞色素b5 Cytb5的血红素结合区（HPGG）[2-3]。

Δ6-脂肪酸脱氢酶（D6D）属于羧基定向的膜结合脱氢酶，它以NADH、细胞色素b5氧化还原酶和细胞色素b5作为电子供体催化甘油脂中的脂肪酸脱氢[4]。……