邵铁梅++安胜军+仵陶+焦展++李雪++刘培++柴锡庆+高维娟

摘要：利用PCR技术，从油菜（Brassica campestris）基因组DNA中克隆20 ku油体蛋白基因上游903 bp 的调控序列NOP，将其与GUS基因融合构建植物表达载体，利用花粉管通道法转化油葵并进行PCR扩增，组织化学染色检测启动子和GUS基因在油葵基因组中的整合和表达情况。结果表明，NOP序列1～903 bp与报道序列同源性为95%，包含驱动基因表达的重要元件及驱动基因在种子中特异表达所必需的核苷酸序列；目的片段已整合到油葵基因组中，NOP具有种子特异性启动子的功能，能够驱动GUS基因在油葵种子中特异性表达，而在油葵根、茎、叶中均不表达。

关键词：油葵；烟草；种子特异性启动子；GUS染色；油体蛋白基因

中图分类号： Q785文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）06-0071-02

收稿日期：2015-12-23

基金项目：河北省高等学校科学技术研究重点（编号：ZH2011208）；河北省人力资源和社会保障厅 2011年度河北省人才工程培养（编号：35）；河北省高等学校科学技术研究重点（编号：ZD2010216）。

作者简介：邵铁梅（1974—），女，河北徐水人，博士，副教授，主要从事植物生物反应器生产蛋白类药物研究。 Tel：（0311）85110321；E-mail：836311038@qq.com。

通信作者：高维娟，博士，教授，主要从事植物生物反应器生产蛋白类药物研究。Tel：（0311）83938058；E-mail：gwj6088@163.com。植物油体表达体系是以种子特异性基因为启动子，驱动目的蛋白基因与油体蛋白基因在植物油体中融合表达，获得转基因植物种子，粉碎种子并离心，回收上层油，利用油体亲脂疏水性去除种子中大部分非目标成分，进一步获得纯化的目的蛋白，使蛋白的分离纯化成本得到显著降低[1]。……