人参CYP716A53v2基因的克隆与序列分析
2016-07-25张涛韩梅刘翠晶
张涛++韩梅++刘翠晶



摘要:研究人参皂苷生物合成途径中的影响因子。以五年生人参根组织为试验材料,提取总RNA,反转录合成cDNA的第1条链,利用PCR法对人参中的原人参三醇合成酶(CYP716A53v2)基因的cDNA进行克隆及序列分析。获得CYP716A53v2基因全长片段为1 506 bp,开放阅读框长1 410 bp,编码470个氨基酸多肽。生物信息学分析显示,CYP716A53v2基因编码蛋白质不含跨膜区域。 说明CYP716A53v2基因与其他植物氨基酸序列具有较高同源性,其中与人参、西洋参、三七同源性分别为99%、98%、98%。
关键词:人参皂苷;基因克隆;序列分析
中图分类号: S567.5+10.1文献标志码: A文章编号:1002-1302(2016)06-0053-04
收稿日期:2015-05-05
基金项目:国家自然科学基金(编号:31270371);国家科技支撑计划(编号:2011BAI03B01-02)。
作者简介:张涛(1991—),男,硕士研究生,主要从事药用植物分子生态学。E-mail:251073371@qq.com。
通信作者:韩梅,教授,主要从事药用植物资源与药材质量评价。E-mail:hanmei77@sohu.com。人参(Panax ginseng C.A.Meyer)为五加科人参属名贵药材,自古以来是中国重要药用植物,有“百草之王”的美誉。现代药理学研究表明,人参皂苷为人参主要药效成分,按苷元基本骨架可分为齐墩果烷型和达玛烷型,属于三萜类化合物。目前,已从人参中分离得到约 90 种人参皂苷单体[1-3]。抗癌活性成分人参皂苷Rg3已经于2000年批准为一类新药[4];随着老龄化人口增加和疾病的改变,如心血管疾病和肿瘤人口的增加,人参皂苷Rg和Re被命名为血管生长因子。人参皂苷含量和组成是人参质量的重要指标,人参皂苷的含量较低,人工合成次生代谢产物人参皂苷尚未实现,对于一些含量甚微的单体皂苷的新药开发还较为困难。……
