王 昭，王 席，杨 威，彭 冬，柳忠玉*

(1.长江大学/湿地生态与农业利用教育部工程研究中心，湖北 荆州 434025；2.长江大学 生命科学学院， 湖北 荆州 434025)

金属硫蛋白基因MT1A在大肠杆菌中的自诱导表达条件优化及其抗镉性

王 昭1,2，王 席2，杨 威2，彭 冬2，柳忠玉1,2*

(1.长江大学/湿地生态与农业利用教育部工程研究中心，湖北 荆州 434025；2.长江大学 生命科学学院， 湖北 荆州 434025)

为了提高金属硫蛋白基因MT1A的高效表达和对重金属的抗性，以菌体密度、可溶性目的蛋白表达量为评价指标，对工程菌自诱导的培养条件(诱导时间、诱导温度)和培养基组分(蛋白胨、酵母粉、甘油、葡萄糖、乳糖)进行优化，并对其抗镉(Cd)性进行分析。结果表明，最优自诱导培养基组分为2.0%蛋白胨、2.0%酵母粉、0.3%甘油、0.05%葡萄糖、0.3%乳糖；重组菌自诱导表达最优培养条件为37 ℃培养 3 h，然后25 ℃继续培养 13 h，此时菌体密度、可溶性蛋白表达量、可溶性蛋白相对产量均最高，分别比未优化ZYM-5052培养基提高77.7%、94.0%、244.8%。当Cd2+浓度为0.5 mmol/L时，高效表达金属硫蛋白的菌株具有明显的抗Cd活性。

金属硫蛋白； 可溶性表达； 自诱导； 抗镉性

随着工农业的快速发展，大量工业废水和生活污水被排放到环境中，造成水体和土壤重金属污染日趋严重。如何有效地预防和治理重金属污染已成为亟待解决的问题[1]。对重金属污染的治理方法主要有农业生态修复、植物修复、微生物修复等。近年来，微生物修复以其高效性和安全性受到科研工作者的广泛关注，并且取得一定进展，其中包括利用微生物表达金属硫蛋白(metallothionein，MT)[2]。……