沈宏忠，翁柏岳

(浙江新昌人民医院 耳鼻喉科，浙江 绍兴 312500)

复方双花片联合西药对急性分泌性中耳炎患者血清及分泌物炎症因子的影响

沈宏忠Δ，翁柏岳

(浙江新昌人民医院 耳鼻喉科，浙江 绍兴 312500)

目的 探讨复方双花片联合西药对急性分泌性中耳炎(secretory otitis media，SOM)患者血清及分泌物肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10，IL-10)的影响。方法 选择2014年8月～2016年6月浙江新昌人民医院收治的200例(244耳)SOM患者随机分为2组，对照组100例(120耳)仅予常规西医治疗，治疗组100例(124耳)在对照组基础上联合复方双花片治疗，治疗前后分别采集患者外周静脉血及中耳积液利用流式细胞术微球阵列法对TNF-α、IL-6及IL-10进行检测，对比2组疗效。结果 治疗组的总有效率为97.58%高于对照组的85.00%，差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平无明显变化，差异无统计学意义。2组治疗后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明显降低，且治疗组明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 复方双花片联合西药治疗SOM的疗效显著，可有效减少中耳积液中的TNF-α、IL-6、IL-10等炎症因子。

复方双花片；急性分泌性中耳炎；TNF-α；IL-6；IL-10

急性分泌性中耳炎(secretory otitis media，SOM)是以中耳积液为主要特征的中耳非化脓性炎性疾病，临床表现主要为耳闷塞感、耳痛及听力下降等，为临床常见耳部疾病。研究显示，感染、咽鼓管功能异常及自身免疫反应是引发SOM发病的主要原因，且在“上下呼吸道炎症一致性”概念得到阐述后，自身免疫反应在SOM发生、发展过程中的作用越来越受关注[1]。肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)及白细胞介素-10(interleukin-10，IL-10)是机体在免疫应答中产生的重要炎症介质，生物学活性多样。研究表明，SOM患者耳积液中的TNF-α、IL-6及IL-10水平异常升高，参与了局部免疫反应[2]。复方双花片是国家中药保护品种，主要成分包括金银花、穿心莲、连翘、板蓝根，具有清热解毒、反病开窍、消肿散结的作用，对慢性咽炎、上呼吸道感染、流行性腮腺炎等均具有良好的治疗效果。本文旨在观察复方双花片联合西药治疗SOM的效果，并探讨其对血清及分泌物TNF-α、IL-6及IL-10的影响，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2014年8月～2016年6月浙江新昌人民医院收治的200例(244耳)SOM患者。随机分为对照组100例(120耳)：男51例，女49例，年龄18～66岁，平均(42.39±3.36)岁，病程1～9d，平均(5.23±0.75)d，左耳77只，右耳43只；治疗组100例(124耳)：男54例，女46例，年龄18～63岁，平均(40.05±5.11)岁，病程1～10d，平均(5.45±0.63)d，左耳75只，右耳49只。2组基线资料比较差异无统计学意义。

纳入标准：①满足以下至少一项主诉：耳内闷塞感，耳鸣，耳痛，听力下降；②耳内镜或鼓气耳镜见鼓室积液征象，鼓膜充血、内陷或液平，活动度受限，鼓膜完整；③纯音听阈测试判断为传导性听力损失，声导抗图为平坦型(B型)或高负力型(C型)；④病程10 d以内；⑤对本研究涉及药物不过敏；⑥知情同意。

排除标准：①患有严重肝肾心疾病或者对本次研究具有影响的其他疾病；②处于哺乳期或者妊娠期妇女；③依从性差，未按照医嘱或者研究要求进行治疗者。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法：对照组仅予常规西医治疗，口服头孢类抗生素7 d，1片/次，2次/天；喷0.5%盐酸羟甲唑啉喷雾剂(云南盘龙云海药业有限公司，国药准字H20113189)，2次/天；治疗组在对照组基础上联合复方双花片(陕西康惠制药股份有限公司，国药准字90Z610992)治疗，4片/次，3次/天。2组均治疗7 d复诊。

1.2.2 一般检查：检查症状及体征，进行纯音测听检查以及声阻抗鼓室导抗检查。

1.2.3 标本采集与检测：治疗前后分别采集外周静脉血2 mL，EDTA抗凝，血清分离后保存于-80 ℃环境中备用；同时在耳内镜下在鼓膜紧张部前下象限穿刺抽取中耳积液0.3～0.5 mL，保存于-80 ℃环境中备用。利用流式细胞术微球阵列法检测血清及中耳积液中的TNF-α、IL-6及IL-10水平。取连续倍比稀释的标准品和待测样品(样品量为50 μL)，样品孵育严格按试剂盒说明书执行，通过流式细胞仪与BDCBA软件对有关数据进行处理分析。具体方法见文献[2]。

1.2.4 疗效评价标准：参照生部颁发的分泌性中耳炎临床研究指导[3]：①治愈：临床症状消失，耳镜检查无异常，声阻抗鼓室图为A型，听力恢复正常；②好转：临床症状好转，耳镜检查轻微异常，声阻抗鼓室图为C型，纯音测听气骨导减小，但未完全正常，听力有所恢复；③无效：不满足前述2点。总有效率=(治愈例数+好转例数)/总例数×100%。

2 结果

2.1 2组患者疗效比较 治疗组患者的总有效率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗期间无明显不良反应病例。见表1。

表1 2组疗效比较[n(%)]Tab.1 Comparison of clinical efficacy between two groups[n(%)]

*P<0.05，与对照组比较，compared with control group

2.2 2组治疗前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平比较 2组治疗前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平无明显变化，组间比较均无统计学意义。见表2。

表2 2组治疗前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平比较Tab.2 Comparison of serum levels of TNF-α,IL-6 and IL-10 pre-and post-treatment between two ±s,pg/mL)

2.3 2组治疗前后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平比较 2组治疗后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明显降低，且治疗组明显低于对照组，组间比较有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2组治疗前后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平比较Tab.3 Comparison of the levels of TNF-α,IL-6 and IL-10 pre-and post-treatment between two ±s,pg/mL)

*P<0.05，与本组治疗前比较，compared with same group pre-treatment；#P<0.05,与治疗后对照组比较，compared with control group post-treatment

3 讨论

SOM为临床的常见病与多发病，儿童发病率高于成人，较多患者是继发于上呼吸道感染，由于难以明确病因，所以较难实现个体化治疗，导致预后差异较大，个别患者迁延不愈可致粘连性中耳炎、鼓室硬化等严重后果而造成听力损失。目前认为，SOM的基本病因是咽鼓管功能异常，此外，其与感染、自身免疫学反应也有关。研究指出，SOM患者的中耳腔内可能存在一种局部细胞因子网，对炎症因子的活化与黏膜酶的活性起着重要作用，直接或间接地决定SOM的转归[4]。SOM患者伴有淋巴细胞亚群异常情况，既往研究发现，与健康人比较，上呼吸道感染继发的SOM患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的比例显著提高[5]。Tregs具有免疫抑制功能，与TNF-α、IL-6、IL-10的关系紧密，Tregs可在自身抗原及多克隆激活剂的作用下活化，并分泌出TGF-β与IL-10等多种因子，且还可表达转录因子Foxp3等，参与炎症反应、自身免疫性疾病以及肿瘤的发生发展[6]。IL-10具有多种效应，不仅可干扰调节性T淋巴细胞与效应T淋巴细胞的活性，而且还可抗血管生成及免疫抑制作用。IL-6参与机体抗感染免疫，并具有调节免疫应答的作用。TNF分泌适量可参与免疫反应，抑制Tregs功能，但分泌过量则会引起炎症反应性疾病及自身免疫性疾病，早有研究证实，在SOM耳积液中的TNF可能多由耳粘膜局部产生并起免疫抑制作用，且含量过高可能会致病情经久不愈[7]。余少卿等[8]研究了多种细胞因子在SOM患者中的表达，结果发现这类患者与健康对照组比较，外周血中TNF、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6及IL-10等细胞因子的表达并无明显差异，差异仅存在于耳积液分泌物中，前者耳积液中细胞因子的表达明显偏高。这提示中耳粘膜参与急性分泌性中耳炎患者局部的免疫反应。中耳的原有保护性免疫被打破，处于免疫失衡状态，炎症因子参与中耳局部免疫反应，清楚了这一点，曾有学者采取地塞米松骨室局部注射对本病进行治疗，结果发现患者病情缓解快，且全身用药不良反应少[9]。

在SOM的治疗方面，西医治疗主要是通过抗生素抗炎症、盐酸羟甲唑啉或盐酸氨溴索等抑制黏液分泌以及使用鼻部收敛剂等，虽然有一定疗效，但部分患者无法达到预期效果；而鼓膜穿刺等治疗又受到患者配合度的制约。中医认为，SOM属“耳鸣”、“耳胀痛”、“卒聋”等范畴，耳仅为症状的表现，真正病因乃肺。目前，中西医结合已成为临床治疗的一大趋势。在中西医联合治疗SOM的报道中，已出现香菊胶囊、柠蒎肠溶软胶囊等几种中成药辅助西医治疗并取得满意效果[10-11]。复方双花片是来源于我国民间医药宝库并经现代工艺制成的中成药，方中的金银花、连翘、板蓝根均具有清热解毒的功效，几味药合用加强清热解毒，而穿心莲具有清肺解毒的功效。经药理研究证实，复方双花片中4味药材的提取物具有较强的杀菌、抗病毒、消炎作用，体内外的抗菌效果均较为突出[12-13]。目前尚无关于复方双花片联合西药治疗SOM的报道，从本研究看，治疗组的总有效率97.58%明显高于对照组的85.00%(P<0.05)，这表明复方双花片可有效增强疗效，治疗效果确切。

本研究结果显示，2组治疗后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明显降低，且治疗组明显低于对照组(P<0.05)，但2组治疗前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平无明显变化，组间比较均无统计学意义。这提示复方双花片对SOM中耳积液中的TNF-α、IL-6、IL-10有明显影响，但对血清中的炎症因子却影响不大，这可能是与中耳粘膜参与SOM患者的局部免疫反应有关。既往研究发现，SOM患者虽然Tregs比例异常增高，但外周血中的TNF-α、IL-6、IL-10却与健康人无较大差异，三种因子仅在中耳积液中表达上调[14-15]，这体现出了免疫调节的复杂性。由表2也可看出，SOM患者血清中TNF-α、IL-6、IL-10处于较低表达状态，且不受治疗明显影响，符合上述结论。

综上所述，复方双花片联合西药治疗SOM的疗效显著，可有效减少中耳积液中的TNF、IL-6、IL-10等炎症因子。

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(编校：薛雪)

Effect of compound Shuanghua tablets combined with western medicine on serum and secretions of inflammation factors in acute secretory otitis media

SHEN Hong-zhongΔ, WENG Bai-yue

(Department of ENT, Zhejiang Xinchang People’s Hospital, Shaoxing 312500, China)

ObjectiveTo investigate the effect of compound Shuanghua tablets combined with western medicine on serum secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 of patients with secretory otitis media.MethodsA total of 200 cases(244 ears) with acute secretory otitis media in Zhejiang Xinchang People’s Hospital from August 2014 to June 2016 were randomly divided into two groups.The control group with 100 case (120ears) were only given conventional western medicine therapy,and the treatment group with 100 case (124ears) were given compound Shuanghua tablets on the basis of the control group.Peripheral venous blood and middle ear effusion of each patient was collected before and after treatment,and to detect the level of TNF-α,IL-6 and IL-10 by cytometric bead array,meanwhile the curative effect of the two groups were compared.ResultsThe curative effect of the treatment group( 97.58%) was higher than the control group(85.00%),the difference were statistically significant(P<0.05).There were no significant difference on serum TNF-α,IL-6 and IL-10 between the two groups before and after treatment.The secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 of the two groups after treatment were significantly reducing,and the treatment group were lower than the control group,the difference were statistically significant(P<0.05).ConclusionCompound Shuanghua tablets combined with western medicine in traetment SOM is effective distinctly,and can reduce secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 effectly.

compound Shuanghua tablets; secretory otitis media; TNF-α;IL-6;IL-10

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.11.042

沈宏忠，通信作者，男，本科，主治医师，研究方向：急性中耳炎的临床治疗，E-mail：lian0610@sina.com。

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