王炳哲

研究的目的和意义

水产养殖病害的种类比较多，相关的病害防治任务就非常艰巨。目前水霉（Saprolegnia）和绵霉（Achlya）两个属中的一些种类常引起水产动物得病，通常称为水霉病。水霉病流行很广泛。在鱼类的繁殖过程当中，水霉病是最为严重的病害。

如果能通过地衣粗提液的抑菌作用，寻找出高效、天然的抗真菌药物，将会创造出很好的经济效益与社会效益。本实验选择长松萝和皮果衣这两种地衣的丙酮浸提液和松萝酸不同溶剂的溶液对几种常见鱼害真菌进行抑制的对比研究，所得的结果可为进一步研究提供参考，并为研制新的抑制病原菌药物提供信息。

实验方法

松萝酸母液及地衣粗提液的制备

松萝酸母液的制备：称取松萝酸20mg，加20mL的丙酮，摇匀，置于4℃冰箱，保存备用。

地衣粗提液的制备：取实验用地衣材料，除去杂草枯枝等杂质，分别称取2g样品剪碎或压碎，置于带磨口塞子的广口玻璃瓶中，加入30mL的丙酮，密封，摇匀，室温浸提约5h，过滤，蒸发得20mL的地衣浸提液。置于4C保温环境中，保存备用。以乙醇、乙酸乙酯为溶剂制备的浸提液方法同上。

菌株的分离培养及鉴定

鱼病相关真菌的来源：长期放养鱼类的水体、水系（岔河水系）中病鱼和观赏鱼。

鱼体分离：在超净工作台无菌环境下，用75%酒精棉球擦拭患病鱼体表2～3s，用无菌水冲洗干净，用解剖刀切取鱼背部、腹部、尾部肌肉（厚度3～4 mm），用镊子取鱼鳞片，放置于PDA培养基平板中央，每个部位做5个重复。置于25℃培养箱培养，逐日观察，直至菌丝长出后，在超净台取菌丝进行镜检，菌丝接种到PDA培养基上，置于25℃霉菌培养箱中培养，培养数天后进行纯化，纯化后得纯菌落，4℃保藏。……