何姗，王朝臣，王树卿

（天津渤海职业技术学院，天津300402）



吸附法发酵生产D-核糖固定细胞的条件研究

何姗，王朝臣，王树卿

（天津渤海职业技术学院，天津300402）

摘要：经优化筛选，选择聚氨酯泡沫（HP）为载体，在pH值为7.0，温度36℃，转速240 r/min因素下，研究优化了吸附法一级种子固定化的培养条件，结论是40 mL培养基装0.3 g载体（约为30片HP片）培养14 h。在此基础上对二级种子固定化的培养时间进行了优化，结论是5 h，相比一级固定化，二级固定化性能明显增加。

关键词：D-核糖；吸附法；种子固定化；

D-核糖是一种具有重要生理功能的五碳糖，在食品和医药等领域有广泛的用途［1］。D-核糖最主要的生产方法是微生物发酵法。固定化技术是将细胞或酶限制在一定空间范围内并连续使用的一种方法，固定化细胞不但可以提高生产效率，延长细胞寿命，增加生产能力而且在生产后期易于细胞的分离、回收［2］。目前固定化细胞的方法主要有包埋法［3］和吸附法［4］。其中吸附法相比包埋法操作简单、相比游离发酵D-核糖产量高和载体廉价等优点［5］。吸附法固定细胞主要是在种子培养阶段进行固定，因此，本文主要对种子培养阶段的条件进行了探索，以期达到提高发酵产量、缩短发酵周期。

1　材料和方法

1.1实验材料

1.1.1菌种

D-核糖生产菌株－转酮酶缺陷型枯草芽孢杆菌。

1.1.2培养基

斜面培养基（g/L）：酵母浸膏7.0，蛋白胨15.0，山梨醇5.0，氯化钠2.0，磷酸氢二钾2.0磷酸二氢钾1.0，琼脂26，调pH值7.0。

种子培养基（g/L）：酵母浸膏5.0，磷酸氢二钾3.0，磷酸二氢钾1.0，葡萄糖20.0，调pH值7.0。

发酵培养基（g/L）：葡萄糖150.0，硫酸铵7.0，硫酸锰0.05，玉米浆20.0。……