张慧，杨胜利

（1浙江省质量检测科学研究院，浙江杭州 310018；2浙江工业大学药学院，浙江杭州 310014）



·科技论文·

超声波转化方法将外源性质粒导入甾短杆菌的研究

张慧1，杨胜利2

（1浙江省质量检测科学研究院，浙江杭州 310018；2浙江工业大学药学院，浙江杭州 310014）

摘要:目的:建立甾短杆菌的高效超声波转化方法，为利用甾短杆菌重组表达功能基因提供方法基础。方法∶采用超声波诱导的方法把外源DNA转化进甾短杆菌基因组中。通过对甾短杆菌生长状态，超声波作用条件等影响因素进行探索。结果∶当采用OD600为0.7的菌体制备感受态细胞、超声波强度为400W、作用时间为40min和质粒浓度为0.2 g/L时，转化效率达到最大值，为384个转化子/ μg DNA。经抽样PCR鉴定所得到的转化子均为阳性克隆。结论通过优化超声波转化条件，从而获得了高效电转化技术方法。

关键词：甾短杆菌；超声波；转化率

近年来由于功率超声设备的普及和发展，超声波对生物反应过程的影响正引起人们强烈的兴趣和高度重视。研究表明：合适强度的超声波作用于生物反应培养液，可增强基因转移效率，增加细胞膜的通透性和选择性，促进酶的分泌，增强细胞的代谢作用，从而，能缩短反应时间，提高产品质量和产量。如在乳酸发酵过程中，采用超声波处理可以提高发酵效率［1，2］。在酵母产酒精的研究中也取得了相类似的效果［3，4］，并且在提高乙醇产量的同时，对酵母生长也起到促进作用［5］。尽管利用超声波作用生物反应过程的研究有所报道，但是多集中在乳酸发酵和乙醇发酵，超声促进微生物转化技术研究国内外未见文献报道。……