王丽婷孙 玮*



激光共聚焦检测双酚A致精母细胞损伤后线粒体膜电位的变化

王丽婷①孙 玮①*

王丽婷,女,(1982- ),本科学历，实验师。第三军医大学生物医学分析测试中心，从事生物医学分析测试工作。

目的：运用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术检测双酚A(BPA)致精母细胞损伤后线粒体膜电位的变化，探讨其作用机制。方法：将培养的GC-2小鼠精母细胞分为对照组、低剂量组和高剂量组，分别加入0、10 μmol/L、100 μmol/L的BPA，一同培养3 h后使用荧光探针JC-1对3个组样本分别进行标记，采用LSCM检测胞内线粒体内JC-1荧光强度的变化。利用LSCM专用软件分析荧光强度，通过荧光颜色的转变检测线粒体膜电位的变化，用红绿荧光的相对比例衡量线粒体去极化的比例。结果：对照组、低剂量组和高剂量组之间红绿荧光的比值有着显著差异。BPA低剂量组和高剂量组的胞内线粒体膜电位明显低于对照组，而高剂量组的胞内线粒体膜电位较低剂量组低。结论：BPA对精母细胞有损伤，且随着剂量加大，损伤越严重。LSCM技术方法灵敏度高，能够实时监测细胞内线粒体膜电位的变化。

激光扫描共聚焦显微镜；双酚A；精母细胞；线粒体膜电位；荧光成像；荧光探针JC-1

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.02.034

①第三军医大学生物医学分析测试中心 重庆 400038

[First-author’s address] Biomedical Analysis Center, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China.

随着工业技术的发展，存在于环境中一些人工合成的化学物质具有体内雌激素的生物效应可干扰实验动物体内正常的内分泌功能，并可造成动物的雄雌性别改变及畸形，这类物质称为环境雌激素，已经成为人类健康的潜在威胁[1]。……