张红涛，于洋，刘玲玲，于泳浩，王国林



实验研究

JNK在氢气改善重度脓毒症小鼠肠屏障功能障碍中的作用

张红涛1，2，于洋1，刘玲玲2，于泳浩1，王国林1

目的探讨c-Jun氨基末端蛋白激酶（JNK）在氢气改善重度脓毒症小鼠肠屏障功能障碍中的作用。方法将80只雄性ICR小鼠按照随机数字表法分为假手术组、氢气对照组、脓毒症组和氢气治疗组，每组20只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备重度脓毒症小鼠模型，假手术组和氢气对照组只进行开腹手术而不行盲肠结扎和穿孔。氢气对照组和氢气治疗组于制模后1 h和6 h分别吸入2%的氢气1 h。于制模后20 h时各组取10只，向胃内灌注异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐（FITC-右旋糖酐），4 h后经心脏穿刺取血并测定血清FITC-右旋糖酐水平。于制模后24 h各组取10只，取腹腔液进行细菌培养并计数菌落形成单位（CFU）；取中段小肠组织，采用酶联免疫吸附试验测定肠组织肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β和高迁移率族蛋白1（HMGB1）水平，采用蛋白免疫印迹法测定肠组织JNK的磷酸化水平（p-JNK）以及紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达，利用光学显微镜和透射电镜分别观察肠组织病理学改变和肠上皮细胞超微结构的变化。结果假手术组和氢气对照组各指标差异均无统计学意义。与假手术组比较，脓毒症组血清FITC-右旋糖酐、腹腔液细菌培养菌CFU和小肠组织TNF-α、IL-1β和HMGB1明显增加，小肠组织p-JNK表达明显增加并伴随ZO-1和Occludin表达下调（均P＜0.05），小肠组织明显损伤伴肠上皮细胞超微结构严重受损。与脓毒症组比较，氢气治……