张 钰，王栋芳，曹 冰，罗世恒，刘雅琼，黄宁华，闫赖赖，王京宇*

1.北京大学公共卫生学院，北京 100191 2.岛津企业管理(中国)有限公司，北京 100020

GC-MS测定血清胆固醇及其标志物前处理条件正交试验优化研究

张 钰1，王栋芳1，曹 冰1，罗世恒2，刘雅琼1，黄宁华1，闫赖赖1，王京宇1*

1.北京大学公共卫生学院，北京 100191 2.岛津企业管理(中国)有限公司，北京 100020

采用正交试验优化GC-MS测定血清胆固醇及其标志物的样品前处理条件，并对最优试验方案进行方法学评价。采用L16(211)正交设计对影响GC-MS测定血清胆固醇及其标志物前处理的3个关键步骤共7个因素——皂化(KOH-乙醇浓度、皂化温度和时间)、萃取(正己烷用量)和衍生化(衍生化温度、时间和用量)进行优化。得到最优前处理条件组合如下：KOH-乙醇溶液浓度为1 mol·L-1； 皂化温度70 ℃； 皂化时间60 min； 萃取剂用量2 mL； 衍生化温度70 ℃； 衍生化时间60 min； 衍生化试剂用量100 μL。所建方法准确性和精密性良好，方法学评价指标优于文献报道。

GC-MS； 正交试验； 胆固醇； 标志物； 前处理

引 言

胆固醇是机体内重要的代谢组分之一，与人体健康和疾病密切相关。胆固醇的代谢与吸收是调节体内胆固醇平衡的两个重要途径[1]，人体血清中含有如角鲨烯、2,4-脱氢胆固醇等胆固醇合成前体，可作为胆固醇合成标志物用于反映机体内源性胆固醇合成效率； 还含有如菜油固醇、β-谷固醇等植物固醇，可作为胆固醇吸收标志物用于反映机体外源性胆固醇吸收效率。将上述胆固醇合成标志物与胆固醇吸收标志物统称为胆固醇标志物[2-5]。……