杨　梅，李　建，杨　蕊，王浩伟，袁红斌

半胱氨酸蛋白酶参与调节ephrinBs/EphBs信号通路活化诱发神经病理性疼痛研究

杨梅，李建，杨蕊，王浩伟，袁红斌

[摘要]目的观察小鼠鞘内注射酪氨酸激酶受体EphB1及其配体ephrinB2-Fc对其神经病理性疼痛行为的作用及对半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达水平的影响。方法昆明小鼠36只，采用数字表法随机分为假手术+生理盐水组(Sham+NS，n=6)、假手术+酪氨酸蛋白激酶受体B1组(Sham+EphB1，n=6)、坐骨神经压迫性损伤+生理盐水组(CCI+NS，n=12)以及CCI+EphB1组(n=12)，于制模前1 d及制模后1、3、5、7、14 d时测定各组小鼠的机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold，MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency，TWL)，并于第5天将CCI+NS和CCI+EphB1组中的6只小鼠处死，取L4-5段脊髓，采用免疫组化方法测定caspase-3阳性细胞数的含量。 另取昆明小鼠24只，采用数字表法随机分为4组，每组6只，即空白对照组、生理盐水对照组(NS, 鞘内注射5 μl NS)、ephrinB2-Fc 0.1 μg组(注射浓度0.02 g/L，体积5 μl)、ephrinB2-Fc 0.5 μg组(注射浓度0.1 g/L，体积5 μl)。于给药前3 h和给药后3、6、9、12、24、48 h测定各组小鼠MWT和TWL，术后48 h取L4-5段脊髓，采用免疫组化方法测定脊髓中caspase-3阳性细胞数的含量。结果在CCI模型中，与Sham+NS和Sham+EphB1比较，CCI+EphB1与CCI+NS 组术后第1、3、5、7 d MWT及术后第3、5、7 d TWL疼痛阈值明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)；与CCI+NS相比，CCI+EphB1组MWT和TWL显著提高， caspase-3阳性细胞数明显减少，差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组及NS对照组相比，ephrinB2-Fc 0.1 μg、0.5 μg组MWT和TWL显著降低， caspase-3阳性细胞数的含量明显增多，差异均有统计学意义(P<0.05)，且浓度越高痛阈值越低，阳性细胞数越多。结论鞘内注射ephrinB2-Fc、EphB1可分别引起小鼠机械痛敏和热痛敏的升高和降低，其机制可能与调节caspase-3表达变化有关。

[关键词]神经病理性疼痛；半胱氨酸蛋白酶3；ephrinB2-Fc ；EphB1 ；鞘内注射

神经病理性疼痛(neuropathic pain，NPP)是指由中枢或者外周神经系统损伤和病变所引起的一种疼痛综合征，以自发性疼痛、痛觉过敏和疼痛超敏为主要表现[1]，目前发病机制不明，但已成为临床亟待解决的难题之一[2]。新近研究证实，轴突导向因子参与了神经病理性痛的病理生理过程，其中，受体型酪氨酸蛋白激酶……