血管紧张素Ⅰ化学发光免疫分析方法的建立
2016-06-29杨超一冯婷婷张雪峰卢金辉
杨超一 冯婷婷 张雪峰 卢金辉 王 斌
(原子高科股份有限公司,北京102413)
血管紧张素Ⅰ化学发光免疫分析方法的建立
杨超一冯婷婷张雪峰卢金辉王斌
(原子高科股份有限公司,北京102413)
[摘要]目的:建立人血管紧张素Ⅰ(Ang Ⅰ)化学发光免疫分析方法,通过测定血浆中血管紧张素Ⅰ的含量计算肾素活性。方法:用生物素标记Ang Ⅰ抗原,荧光素标记AngⅠ抗体,将抗荧光素抗体包被于化学发光板,以链亲和素酶为催化剂,采用竞争法建立Ang Ⅰ化学发光免疫分析方法。结果:本方法的测量范围为100~7 800 pg/ml,灵敏度为24.3 mU/ml,批内变异为5.6%~8.7%,批间变异为6.8%~10.4%,回收率为95.4%~105.3%,稀释实验测定值与理论值呈线性相关,相关系数为r=0.999。与放射免疫分析试剂盒的相关性方程分别为y=0.95x+235.70,相关系数r=0.973。包被板、生物素标记AngⅠ抗原以及荧光素标记AngⅠ抗体在37℃存放一周稳定性良好。结论:方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。
[关键词]血管紧张素Ⅰ(Ang Ⅰ);生物素;荧光素;链亲和素酶;化学发光免疫分析
肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)是人体血压、水和电解质平衡的重要调节系统,对维持人体内环境的稳定起着十分重要的作用。肾素在生理和许多病理情况下,其数量和活性决定了整个体系的活性,因此测定肾素活性对判断RAAS活性是非常重要的。实际临床中肾素活性是通过人血浆中AngⅠ产生的速率测定的,即37℃条件下1 h肾素原被肾素催化转化为Ang Ⅰ的量。目前检测血浆中肾素活性、血管紧张素Ⅱ和醛固酮含量已经成为原发性和继发性高血压、原发性醛固酮增多症等疾病的诊断、治疗及研究的重要指标[1-5]。……
