张琴静，陈爱琴，宁松，高超，蒋春艳，崔毓桂，陈娟，覃莲菊，刘嘉茵

(南京医科大学第一附属医院生殖医学科，南京　210029)

·实验研究·

建立不同类型干细胞并比较其分泌细胞因子的水平

张琴静，陈爱琴，宁松，高超，蒋春艳，崔毓桂，陈娟，覃莲菊*，刘嘉茵*

(南京医科大学第一附属医院生殖医学科，南京210029)

【摘要】目的比较不同类型干细胞分泌细胞因子的水平，探讨其潜在的临床意义。方法建立人类胚胎干细胞(hESCs)、脐带间充质干细胞(UMSCs)、羊膜间充质干细胞(AMSCs)株系；实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析干细胞分泌细胞因子水平：(1)促炎因子，包括白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子(TNF-α)；(2)抑炎因子白细胞介素-10(IL-10)；(3)生长因子，包括肝细胞生长因子(HGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、干细胞因子(SCF)和血管内皮生长因子(VEGF)；(4)基质金属蛋白酶MMP-1及其抑制剂TIMP-1；(5)血管形成因子(Angiogenin)，白血病抑制因子(LIF)以及骨形成蛋白(BMP4)。结果女性UMSCs分泌生长因子、血管生成因子、造血因子、抑炎因子等的能力显著强于hESCs、AMSCs(P<0.05)；女性hESCs、男性UMSCs分泌金属蛋白酶的水平显著高于其它干细胞(P<0.05)。结论女性UMSCs可能具有更好的促进细胞生长、改善血供的能力；而女性hESCs、男性UMSCs则可能具有更强的降解结缔组织的能力。

【关键词】人胚胎干细胞；人羊膜间充质干细胞；人脐带间充质干细胞；细胞分泌因子

Methods： The cell lines of human embryonic stem cells (hESCs)，umbilical cord mesenchymal stem cells (UMSCs) and amniotic mesenchymal stem cells (AMSCs) were established and identified. The expressions of secretory cytokines，such as：(1) pro-inflammatory factors of IL-6，IL-8 and TNF-α；(2) anti-inflammatory factor of IL-10；(3) Growth factors (HGF，BDNF，SCF and VEGF)；(4) matrix metalloprotein (MMP-1) and its inhibitor TIMP-1；(5) angiogenic factor，LIF and BMP4 were determined by real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR).

Results： The expresses of growth factors，angiogenic factor，LIF and IL-10 in female UMSCs were significantly higher than those in hESCs and AMSCs(P<0.05). The expressions of MMP-1 in female hESCs and male UMSCs were significantly higher than those in other stem cell lines (P<0.05).

Conclusions： Female UMSCs may have stronger capacity to promote cell growth and improve blood supply. Female hESCs and male UMSCs may be more powerful in degradation of connective tissue.

(JReprodMed2016，25(6)：528-539)

干细胞是一种具有自我更新、增殖能力的特殊细胞，且具有多向分化潜能，在特定培养条件下能分化为特定类型的细胞[1]。最近几年，认为干细胞治疗是能够修复和恢复受伤组织正常功能，具有潜力的替代治疗方法[2]。卵巢功能早衰(POF)是引起女性不孕的常见原因，同时也增加了女性退行性疾病的发生率，如心血管疾病、骨质疏松、认知障碍[3-5]。针对POF的治疗，目前广泛接受的是激素替代疗法(HRT)[6]，但该疗法大大增加了静脉血栓、卵巢癌和乳腺癌发生的风险[7-8]。……