徐宏军，韩　焘，岳丰雄，周　智，舒经香，翟新验，胡来根，杨汉春（.中国农业大学动物医学院，北京海淀009；.成都天邦生物制品有限公司，四川成都6000；.中国动物疫病预防控制中心，北京朝阳005）



高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（J XA1-R株）微载体悬浮培养工艺研究

徐宏军1，2，韩焘3，岳丰雄2，周智3，舒经香2，翟新验3，胡来根2，杨汉春1
（1.中国农业大学动物医学院，北京海淀100193；2.成都天邦生物制品有限公司，四川成都610100；3.中国动物疫病预防控制中心，北京朝阳100125）

摘要：为了建立高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）的Marc-145微载体细胞悬浮培养工艺以提高HPPRRSV抗原效价，以BC-7L生物反应器微载体悬浮培养Marc-145细胞，对HP-PRRSV接毒时间、接毒剂量、维持液血清浓度、溶氧量参数、病毒增殖温度等工艺参数进行了摸索和优化。通过细胞悬浮培养逐级放大工艺，在BC-100L生物反应器中培养Marc-145细胞，以优化后HP-PRRSV悬浮培养工艺进行3个批次的病毒悬浮培养。结果在Marc-145细胞微载体悬浮培养的第4天按照感染复数（multiplicity of infection，MOI）为0.1的剂量接毒，接毒后以2%新生牛血清的维持液进行维持培养，溶氧参数设置为40%，最佳培养温度为37℃，最佳收获病毒时间为70～74 h。BC-100L生物反应器中培养的3批病毒增殖曲线与BC-7L培养的病毒增殖曲线相近，在接毒后72 h左右达到病毒效价高峰，病毒含量均不低于108.0TCID50/mL。表明HP-PRRSV悬浮培养工艺稳定，可以实现逐级放大、规模化生产。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒；微载体；生物反应器；悬浮培养

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起猪的接触性传染病，主要引起母猪怀孕后期流产、早产、死胎和木乃伊胎等繁殖障碍。……