杨嘉玉，韦　莉，王　菁，侯　磊，全　荣，朱珊珊，阎　旭，李子璇，刘　超，刘　爵

（1.北京农学院动物科技学院，北京昌平102206；2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京海淀100097）

YANG Jia-yu1，2，WEI Li2，WANG Jing2，HOU Lei2，QUAN Rong2，ZHU Shan-shan2，YAN Xu2，LI Zi-xuan2，LIU Chao1，2，LIU Jue2（1.Animal Science and Techolagy College，Beijing University Of Agriculture，Beijing 102206，China；2.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences，Beijing 100097，China）



猪流行性腹泻病毒N蛋白杆状病毒表达与间接ELISA方法建立

杨嘉玉1，2，韦莉2，王菁2，侯磊2，全荣2，朱珊珊2，阎旭2，李子璇2，刘超1，2，刘爵2

（1.北京农学院动物科技学院，北京昌平102206；2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京海淀100097）

摘要：为了检测猪群中猪流行性腹泻（PED）抗体水平，用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统，构建含有PEDV N基因的重组杆状病毒rBac-PEDV N并在昆虫细胞中获得表达。用纯化的重组N蛋白作为包被抗原，建立了检测PEDV抗体的间接酶联免疫吸附试验（ELISA）方法。与Western Blot的符合率为91.3%，说明该方法适用于PED的临床诊断。

关键词：猪流行性腹泻病毒；N蛋白；Bac-to-Bac杆状病毒表达；间接ELISA

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种急性高度接触性猪肠道传染病，主要临床特征表现为水样腹泻、脱水、呕吐和哺乳仔猪高度致死。由于变异毒株的出现，使得流行强度增大，病情更为复杂，引起了业界的广泛关注，但目前尚无商品化病毒血清检测试剂盒。PEDV编码的N蛋白在PEDV的结构蛋白中所占比例最大，而且在同种病毒之间具有高度的保守性[1]。同时，N蛋白还具有较强的抗原性，可以诱导宿主的细胞免疫和体液免疫，在病毒感染早期，猪体能迅速产生抗N蛋白抗体。鉴于N蛋白的特点，本研究利用杆状病毒表达系统表达PEDV N蛋白，并用纯化的N蛋白作为包被抗原，建立检测血清样品的PEDV间接ELISA方法，用于PEDV急性或感染早期的快速诊断具有很好的应用前景[2-4]。……