叶三仙, 罗云敬*, 乔树亮, 李 莉, 刘彩虹, 史建龙，安学静

1. 北京工业大学生命科学与生物工程学院，北京 100124 2. 中国检验检疫科学研究院，北京 100123 3. 包头出入境检验检疫局，内蒙古 包头 014010

停流荧光法研究牛血清白蛋白和叶酸反应动力学

叶三仙1, 罗云敬1*, 乔树亮3, 李 莉2, 刘彩虹2, 史建龙1，安学静1

1. 北京工业大学生命科学与生物工程学院，北京 100124 2. 中国检验检疫科学研究院，北京 100123 3. 包头出入境检验检疫局，内蒙古 包头 014010

叶酸属于B族维生素，作为生物体内转移一碳单位酶系中的辅酶，与其他维生素相互作用，共同维持体内红细胞的稳定，对氨基酸之间的转化、细胞的分裂生长，蛋白质合成的反应都有重要意义。药物半衰期、峰浓度和反应速度常数是研究药代动力学的重要参数，实验运用荧光分光光度计和停流光谱分析仪研究了仿生环境下牛血清白蛋白和叶酸反应的动力学参数，为叶酸相关的药物代谢参数提供参考。结果表明：利用Stern-Volmer方程处理荧光猝灭实验数据，得到25, 30和37 ℃下叶酸对牛血清白蛋白内源荧光的静态猝灭常数分别为2.455×1010，4.900×1010和6.427×1010L·mol-1·s-1；动力学反应速率常数的计算结果表明不同温度、pH值和缓冲介质下BSA和叶酸反应的速率常数都大于100 mol·L-1·s-1，阐明了BSA与叶酸之间的猝灭机理是通过形成复合物的静态猝灭过程；生理温度下，牛血清白蛋白浓度与其初始浓度满足二级反应公式，相关系数为0.998 7，药代半衰期t1/2为0.059 s；反应的表观速率常数随着叶酸浓度的增加呈线性增加趋势，且叶酸催化牛血清白蛋白荧光猝灭的速率常数kcat=3.174×105mol·L-1·s-1。……