杨秀芬，荣 俊，李国攀

(长江大学生命科学学院，湖北荆州434025；长江大学生物医药研究所，湖北荆州434025)

黄巧珍

(浙江诺倍威生物技术有限公司，浙江 杭州 310000)



猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因的原核表达

杨秀芬，荣 俊，李国攀

(长江大学生命科学学院，湖北荆州434025；长江大学生物医药研究所，湖北荆州434025)

黄巧珍

(浙江诺倍威生物技术有限公司，浙江 杭州 310000)

[摘要]根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M基因序列设计2对引物，通过PCR扩增得到了PRRSV M基因的全长片段和N-末端截短67个氨基酸序列的MNd67基因片段，分别将这些片段插入到表达质粒pET-28a(+)的多克隆位点上构建重组表达质粒，PCR、酶切及测序鉴定表明，成功构建了2种重组表达质粒(pET28a-PRRSV M和pET28a-PRRSV MNd67)。重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)后利用α-乳糖诱导其表达，SDS-PAGE电泳分析表明，E.coli BL21(DE3)/ pET28a-PRRSV MNd67成功表达分子质量为14ku的重组蛋白，而E.coli BL21(DE3)/pET28a-PRRSV M未见明显的表达蛋白。试验结果表明已成功表达截短的PRRSV M蛋白，可为PRRSV诊断抗原和疫苗研究奠定基础。

[关键词]猪生殖与呼吸综合征病毒；M蛋白；原核表达

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus，PRRSV)引起的一种高度接触性传染病，临床表现主要以妊娠母猪流产、早产、产死胎和木乃伊胎等繁殖障碍和仔猪呼吸困难为特征[1]。我国于1996年发现该病[2]，其后广泛地流行于全国各地[3]，并成为我国养猪生产中主要疫病之一。2006年以来，我国出现和流行以Nsp2编码区缺失30个氨基酸为分子特征的高致病性PRRSV，感染猪群出现高发病率和高死亡率，给我国养猪业造成了巨大的经济损失[4,5]。……