文/山东绿都生物科技有限公司 李天芝 于新友文山东省滨州畜牧兽医研究院 沈志强



猪瘟活疫苗中BVDV外源病毒一步法RT-PCR快速检测方法的建立及应用

文/山东绿都生物科技有限公司 李天芝 于新友文
山东省滨州畜牧兽医研究院 沈志强

摘 要为检测商品化猪瘟细胞毒活疫苗中牛病毒性腹泻病毒污染，根据牛病毒性腹泻病毒5＇端非编码区基因保守序列设计引物，建立了检测牛病毒性腹泻病毒一步法反转录——聚合酶链(RT-PCR)方法，并对其特异性、敏感性进行了研究。该一步法RT-PCR对牛病毒性腹泻病毒扩增结果为阳性，对照毒株扩增结果均为阴性，对牛病毒性腹泻病毒检测的灵敏性为1pg总RNA量，应用该方法，检测了32批猪瘟细胞毒活疫苗样品，以上结果表明，该一步法RT-PCR方法检测速度快、特异性强、敏感性高，可用于猪瘟细胞毒活疫苗中污染的BVDV外源病毒检测。

关键词猪瘟；牛病毒性腹泻病毒；检测

猪瘟(Classical swine fever，CSF)由猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)引起的一种猪高度传染、致死性疾病，我国将猪瘟列为一类动物疫病[1]。牛病毒性腹泻病(bovine viral diarrhea，BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus，BVDV)引起的以发热、黏膜糜烂溃疡、腹泻、咳嗽、持续性感染与免疫耐受以及怀孕母牛流产、畸胎甚至死胎等为主要特征的牛传染病[2]，我国将牛病毒性腹泻病列为禁止入境的二类检疫对象[3]。BVDV和CSFV同属于黄病毒科瘟病毒属中的成员[4]，BVDV还可引起猪、骆驼、羊、鹿等多种动物感染发病[5]，给各国养殖业造成了严重的经济损失。猪感染BVDV后可产生类似慢性猪瘟的临床症状和病理变化，怀孕母猪可致流产，产出畸形胎儿[6]，免疫BVDV污染的猪瘟细胞毒活疫苗是猪感染BVDV一种重要途径。……