水产品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌多重PCR检测方法的建立
2016-06-07陈永军何再平白雪瑞赵梦苏刘景云
中国动物传染病学报 2016年1期
蒋 蔚,易 力,陈永军,何再平,白雪瑞,赵梦苏,刘景云,王 权
(1. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;2. 洛阳师范学院生命科学学院,洛阳 471022)
水产品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌多重PCR检测方法的建立
蒋 蔚1,易 力2,陈永军1,何再平1,白雪瑞1,赵梦苏2,刘景云2,王 权1
(1. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;2. 洛阳师范学院生命科学学院,洛阳 471022)
摘 要:霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌是引起全球范围的食源性疾病的重要病原菌,建立一种能准确鉴别这3种弧菌的方法具有重要意义。groEL基因是包括弧菌属在内的多种细菌检测的分子标记。本研究根据3种弧菌的groEL基因分别设计引物,经PCR扩增及反应条件的优化,建立一种能同时检测这3种弧菌的多重PCR方法。结果表明应用多重PCR技术对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌能分别特异性地扩增出418、644、192 bp的目的片段。检测其他非目标供试菌时,不出现任何扩增条带。敏感性检测结果表明,对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌最低检测限分别为102、102、103CFU/mL。人工染菌水产品检测结果显示,所建立的多重PCR方法能够有效检测出目的细菌,而未染菌组均为阴性。本文通过建立的多重PCR方法实现了对这3种弧菌的同时检测,具有快速、灵敏度高和特异性强等优点,对水产品中这3种弧菌的检测和流行病学调查具有重要意义。
关键词:霍乱弧菌;副溶血弧菌;创伤弧菌;groEL基因;多重PCR
近几年弧菌引起的食源性疾病已成为当今许多国家面临的公共卫……
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